تحديد بعض المعايير المناعية المرتبطة بـ miRNA 31,192 بين المصابين بعدوى Covid-19

الباحث

هديل صلاح مهدي المسعودي

المشرف

عبدالنبي جويد المعموري - رحيم طعمه عبيس المعموري

الجامعة

جامعة بابل

الكلية / القسم

كلية العلوم للبنات / علوم الحياة

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

miRNA ; Immunological Parameters ; COVID-19 ; Cytokines

ينتمي فيروس كورونا (SARS COV-2) الى فيروسات الحمض النووي الريبي RNA التي تسبب المرض للإنسان والحيوانات الأخرى عن طريق دخول الجسم من خلال مستقبلات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 (ACE2) الموجودة في عدة أعضاء مثل القلب والرئتين والكلى والجهاز الهضمي. الفيروسات الكبيرة التي تسمى الفيروسات التاجية تكون كروية ، ومغلفة ، وتحتوي على امتدادات تبرز من السطح بهيئة اشواك بالإضافة إلى امتلاكها جينوم من نوع حامض نووي رايبي أحادي االشريط موجب. وخلال المدة الزمنية من ايلول 2021 إلى كانون الثاني- 2022 تم جمع تسعين عينة دم ، وتم جمع 50 عينة دم من المرضى المصابين ب19- Covid الراقدين في مستشفى الحسين التعليمي في محافظة كربلاء ، و40 عينة من أفراد أصحاء كمجموعة ضابطة. تراوحت أعمارهم بين 80-0 سنة. تم تشخيص الاصابة ب Covid-19 باستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي (RT-PCR) وبينت النتائج أن نسبة الاصابة بفيروس SARS —COV2 في الذكور )752( أعلى مما عليه GLY! )748( . وكان اغلب المصابين في هذه الدراسة ليس لديهم أي مرض مزمن ell مدة الدراسة ،في حين كان بعض المصابين يعانون من داء السكري وارتفاع ضغط الدم بنسبة )718( لكل مرض ، و 10/ من المصابين قيد الدراسة لديهم كلا المرضين في في نفس الوقت (السكري وارتفاع ضغط الدم) ،وكانت نسبة المصابين الذين يعانون من التجلط الرئوي حوالي(6/). كانت نسبة المصابين المدخنين dil من غير المدخنين بحوالي (14/)و (86/)على التوالي. تمت دراسة بعض المتغيرات المناعية في امصال 50 مريضاً و 40 شخصاً سليماً باستعمال فحصي الامتزاز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) و المناعي المتالق(1]14 ). كانت هناك زيادة في مستويات انترلوكين6 والبروتين التفاعلي ') في المصابين اكثر مما عليه في الاصحاءءوكانت مستويات انترلوكين6 والبروتين التفاعلي©) وخلايا الدم البيضاء في الاناث المصابات اعلى مماعليه في الذكور المصابين.كانت هناك زيادة في مستويات انترليوكين 6 في المصابين الذين يعانون من داء السكري بينما اظهر البروتين التفاعلي C تراكيز اعلى في المصابين الذين لديهم تجلط رئويء وكان عدد خلايا الدم البيض اعلى في المصابين الذين يعانون من ارتفاع ضغط الدم بالمقارنة مع الامراض المزمنة المناعي المرتبط بالانزيم انها اعلى في الاصحاء مما عليه في مصابيي كوفيد-19.. كانت النتيجة عند قياس مستويات HLA-DR,HLA-G)HLA ) بواسطة فحص الامتزازالمناعي المرتبط بالانزيم أعلى في مجموعة الضابطة بالمقارنة مع مجموعة المصابين. لم تكن هناك فروق ملحوظة في مستوى HLA-DR بالنسبة للمصابين بين الجنسين بينما كانت هناك زيادة واضحة في مستوى HLA-G في الذكورالمصابين بالمقارنة مع الاناث المصابات. كان أعلى مستوى ل HLA-DR في المصابين ضمن الفئة العمرية )59-50 ) بتركيز 3.82 نانوغرام. ، بينما أظهرت نتيجة HLA-G أن المستوى الأعلى تم رصده في الفئة العمرية للمصابين (49-40 عامًا ، عند 606.66) مقارنة بالفئات العمرية الأخرى. المرضى المدخنين لديهم مستوى dil من HLA -DR و HLA-G مقارنة مع غير المدخنين من المرضى والمجموعة الضابطة ، بمتوسط (2.70 ، 456.15) sale sil على التوالي . قيمت جينات microRNAs في المرضى المصابين بفيروس SARS CoV-2 والأفراد الأصحاء ، وكشفت النتيجة أن الجين 192- microRNA إيحابي بنسبة 84 #/ مقارنة مع 16 / كانت النتيجة سلبية ، في حين أن الجين الآخر 31 - microRNA لديه 36 / lal نتيجة مقارنة ب 64/ كنتيجة سلبية ، بالإضافة إلى 100/ من جين housekeeping gene ، كانت أعلى قيمة Cycle threshold لجين 31- MIRNA مقارنة مع حينات microRNA-192 وكذلك housekeeping gene في المرضى المصابين. تشير قيمة Cycle threshold المنخفضة للقيمة الحدية للدورة (34.76) لجين limicroRNA-31 مستوى dle من هذا الجين في المصابين قيد الدراسة 2 نظرًا لوجود علاقة عكسية بين رقم Cycle threshold4،8 ومستوى Loin microRNA كانت قيمة Cycle threshold للجينعمعع housekeeping (24.39). هذه الدراسة بينت أن الشيخوخة تعد عاملا رئيسيا لجعل الناس أكثر عرضة للاصابة ب كوفيد 9 .يبدو أن IL-6 هو السايتوكين الحركي الأكثر أهمية في احداث الاضطرابات المناعية وومتلازمة الضائقة التنفسية الحادة في مصابي00110-19 .يتوقع أن الفئة الثانية HLA- DR أكثر فعالية في الإناث المصابات مما عليه في الذكور المصابين وقد يرتبط بآلية المناعة النشطة Yau من الفئة (HLA-G) GLY! وقد يكون سببا للاستجابة المناعية السريعة في الاناث المصابات ب 0510-19©.

Coronaviruses (CoVs) are RNA virus family that causes sickness in humans and other animals by entering the body through Angiotensin converting enzyme2 receptors (ACE2) that located in organs such as the heart, lungs, kidneys, and digestive tract. The big particle viruses known as coronaviruses are spherical, enveloped, and contain surface protrusion- forming spikes in addition to having a positive-sense single-stranded RNA genome. During September-2021 to January – 2022 ninety samples of blood were collected, 50 blood samples were collected from hospitalized patients who infected with Covid 19, in AL-Hussein Teaching hospital in Kerbala, and 40 samples were collected from healthy individuals as a control group, their age ranged between 20- 80. The Covid-19 infection of patients was checked by using real- time polymerase chain reaction (RT-PCR) technology. The result found the male patients have higher percentage (52%) than female (48%) of SARS –Cov2 infected patients. The most group of infected patients in the present study have no other chronic disease at the time of study , the diabetes and hypertension were shown in a group of patients ( 18%) for each disease , 10% of studied patients have both diseases at the same time (diabetes and hypertension), only ( 6 % ) have pulmonary thrombosis. The smoker patients have lower percentage than non-smoker as 14% and 86% respectively. Some immunological parameters in sera of 50 patients and 40 healthy controls were studied by using enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and fluorescence immunoassay (FIA). Increased levels of interleuken-6, C-reactive protein in infected patients in comparison with healthy individuals, and increased levels of interleukin-6, C-reactive protein, and WBCs among infected females in comparison with infected males . The SARS-Cov 2 infected patients with diabetes showed that increase in IL-6 level in comparison with other conditions, while more CRP concentration was shown in complicated patients in which have pulmonary thrombosis, white blood cells have more count in hypertensive condition associated with SARS COV- 2 infection rather than other studied conditions. Human leukocyte antigens (HLA-DR and HLA-G) levels were estimated by ELISA, the levels of HLA were higher in control group compared with patients group. As for the gender ratio and HLA types (HLA-DR and HLA-G) of patients , there is no noticeable difference between males and females in the values of HLA-DR, while there is a clear increase in the values of HLA-G in male patients than in females. The results of the age groups of patients and the HLA types (HLA-DR , HLA-G) showed that the age group (50-59y) have higher level of HLA- DR (3.82ng/l) in comparison with other age groups, while the result of HLA-G show that the higher level were spotted at age groups ( 40 -49 y, at 606.66) in comparison with other age groups. The smoker patients have lower level of both HLA –DR and HLA-G in comparison with non- smoker of patients and control , at mean ( 2.70 , 456.15)ng/l , respectively. Evaluations of microRNAs were performed in SARS CoV-2 infected patients and healthy individuals, the result revealed microRNA - 192 gene have 84 % positive result in comparison with 16 % in which have negative result, while the other gene MiRNA - 31 have 36% positive result in comparison with 64% as a negative result, as well as 100 % of housekeeping gene, the cycle threshold value showed the high level of MIRNA -31 compared with microRNA - 192 as well as housekeeping gene in infected patients. The low cycle threshold value of microRNA -31 cycle threshold value (34.76) refer to high level of such gene in studied patients, because there is inverse relationship between cycle threshold value number and microRNA level. While the cycle threshold value of housekeeping gene revealed that (24.39). This study revealed the aging plays a major role to making persons more susceptible to Covid-19 infection. IL-6 appears to be the most important driver of immune dysregulation and ARDS in Covid-19. The HLA- Class II ( HLA-DR) , more predicted work in female rather than male at the infected population , and might be associated with active immune mechanism rather than Class I (HLA-G). The overall result might be refer to that rapid enhancement in immunological response among female patients infected with SARS COV -2 virus

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب