خصائص بعض من عوامل الضراوة لبكتريا ستينوتروفوموناس المالتوزية المعزولة من عينات الادرار لمرضى سرطان البروستات والمثانة: الاكتشاف البيولوجي والجزيئي

الباحث

ايناس عمار توفيق

المشرف

ندى هشام عبد اللطيف المدلل

الجامعة

الجامعة العراقية

الكلية / القسم

الطب / الأحياء المجهرية

الشهادة

ماجستير

السنة

2023

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

Stenotrophomonas maltophilia;Virulence factors;Bladder cancer;Prostate cancer

بكتريا الستينوتروفوموناس المالتوزية هو ممرض انتهازي يمكن ان ينتقل من خلال مصادر المستشفيات مثل المطهرات الملوثة والسوائل الوريدية ومياه المستشفيات والقسطرة ومعدات غسيل الكلى وما الى ذلك ، يمكن عزلها في المستشفيات من المرضى اللذين يعانون من نقص في المناعة والمصابين بالسرطان مثل سرطان الدم والاورام اللمفاوية ، قلة العدللات ، تلف الغشاء المخاطي الناجم عن العلاج الكيميائي او الاشعاعي 2 والاسهال . هذه البكتريا تسبب العديد من الامراض الانتهازية مثل تسمم sell الاصابات الرئوية، التهاب المجاري البولية والاصابات الجلدية والانسجة الرخوة. وبسبب المقاومة الداخلية للمضادات تعتبر الاصابة بهذه البكتريا على day الخصوص من الاصابات الخطرة مما يستلزم اما تأخير بدء العلاج بمضادات الميكروبات او استخدام عوامل مضادات حيوية اكثر سمية او اقل فعالية . كان الهدف من الدراسة الحالية هو عزل وتحديد بكتريا الزائفة المالتوزية من عينات بول مرضى سرطانن المثانة والبروستات والكشف عن بعض جينات عوامل الضراوة بواسطة تفاعل البلمرة المتسلسل وتحديد النشاط البيولوجي لبعض عوامل الفوعة ، تأثير بعض المواد الكيميائية على هذه العوامل و دراسة التأثير السمي للخلايا للمستخلص البكتيري باستخدام خطوط الخلايا . تضمنت هذة الدراسة 120 عينة تم جمعها من مرضى سرطان البروستات والمثانة ومرضى التهاب المسالك A gull المقيمين في مستشفى الامل الوطني للأورام ومستشفى غازي الحريري dal pall التخصصية / مستشفى مدينة الطب ، بغداد/, العراق . وزرعت على اوساط اكار الدم ،اكار الماكونكي والوسط الاختياري VIA وتم دراسة نمط الحساسية للمضادات الحيوية باستخدام جهاز الفايتك ثم فحص عوامل الضراوة للبكتريا مثل AS pall ،و مقاييس انتاج الليسيثينيز و البروتينيز و اللايبيز ، والقابلية على تكوين الاغشية الحيوية باستخدام امين الاثيلين رباعي حمض الاستيك والكركمين لتحديد التراكيز الاقل تثبيط . والتحري عن وجود جينات عوامل الضراوة باستخدام تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل وكذلك تمت دراسة النشاط السمي لبكتريا المعزولة باستخدام خلايا الارومات الليفية البشرية الطبيعية . اظهرت النتائج ان 87/120 )%72.5 ) فقط من عينات الادرار كانت ايجابية لنمو البكتريا ، متضمنة الانواع المختلفة من البكتريا . تشكل بكتريا الزائفة المالتوزية 87/7 )%8( من النمو الكلي للبكتريا ولديها مقاومة عالية بنسبة 985.7 للمضادات الحيوية السلفوناميد. اضهرت جميع العزلات نشاط انحلال الدم بيتا ، والقدرة على تراكيز ثنائي امين الاثيلين رباعي حمض الاستيك والكركمين التي تثبط نمو البكتريا 100 و80 ملغم /مل مما اعطى مناطق تثبيط 26ملم و15ملم على التوالي ، بالاضافة الى ذلك اظهر الكركمين نشاطا مضادا للبكتريا . كانت جرعة الكركمين اللازمة لوقف نمو البكتريا 260ملغم/مل ، مما ادى الى انشاء منطقة تثبيط 14 ملم . وكانت نسبة العزلات التي تحوي جين سول 7/7 )%100( وجين الهيم كان 7/3 )%42.8( اظهر النشاط السام للخلايا ان البكتريا كانت شديدة السمية للخلايا الليفية البشرية العادية ، مع اعلى نسبة موت واقل كثافة ضوئية 9068 و 0.25 على التوالي بتركيز 100غرام/ مل من الراشح البكتيري ، بينما تم تسجيل الكثافة الضوئية وكان نصف التركيز المثبط الاقصى كان A935 في الختام ، نظرا للمستوى العالي من المقاومة للمضادات الحيوية للسلفوناميد لبكتريا الزائفة المالتوزية ، فان Gall عن مضادات حيوية جديدة وفعالة قد يكون علاج مثالي لعدوى البكتريا الحامل للسول ، خاصة في المرضى الذين يعانون من نقص المناعة والمرضى المصابين بامراض خطيرة . من المرجح ان يصاب المرضى الذين يعانون من نقص المناعة بالعدوى الممرضة الانتهازية الزائفة المالتوزية ، والتي يمكن ان تنتج مجموعة واسعة من المستضدات . النشاط المضاد البكتيري لتراكيز ثنائي امين الاثيلين رباعي حمض الاستيك والكركمين ضد هذه البكتريا . النشاط السام للخلايا الناجم عن البكتريا على الخلايا الليفية البشرية الطبيعية ، والتي قد توفر قوة دافعة للعمل المستقبلي على توصيف السموم والانزيمات .

Stenotrophomonas maltophilia, an opportunistic pathogen that can be transmitted through nosocomial sources such as contaminated disinfectants, intravenous fluids, hospital water, catheters, dialysis equipment, and so on, can be isolated in hospitals. In immunocompromised hosts, such as those with cancer, such as leukemia and lymphoma, neutropenia, mucosal damage caused by chemotherapy or radiation, and diarrhea, S. maltophilia can cause opportunistic infections such as bacteremia, pulmonary infections, urinary tract infections, and skin and soft tissue infections (SSTI). Because of intrinsic antibiotic resistance, Stenotrophomonas infections are particularly dangerous, necessitating either a delay in the initiation of active antimicrobial therapy or the use of more toxic or less effective antibiotic agents. This Cross-Sectional study included 120 samples collected from prostate and bladder cancer patients and urinary tract infection patients admitted Gazi AL-Hariry Specialized Surgery hospital / Medical City Hospital and AL-Amal National Cancer Hospital, Baghdad, Iraq, then cultured on MacConkey, blood agar and VIA media. Studying their antibiotic susceptibility pattern using VITEK-2 compact system then examining the virulence factors of bacteria, such as motility, lecithenase production assay, protease activity, lipase activity, formation of biofilm utilizing tissue culture plate method and siderophore production using M9 medium, and activity of inhibitors such as EDTA and curcumin to determine the minimum inhibitory concentrations MIC, and screening for the presence of virulence genes using polymerase chain reaction technique. Cytotoxic activity was studied also for S.maltophilia isolate using normal human fibrocyte cells. The results showed that just 87/120 (72.5%) of urine samples were positive for bacterial growth, including various species of bacteria. Stenotrophomonas bacteria made up 7/87 (8%) of the overall bacteria growth and have a high 85.7% resistance to sulfonamide antibiotics. All isolates exhibited beta hemolysis activity, motility, and the ability to produce lecithinase, protease, lipase, biofilm, and siderophores. EDTA concentrations that inhibited bacterial growth were 100, 80 mg/ml, giving inhibition zones of 26 mm and 15 mm, respectively, Additionally, curcumin exhibited antibacterial activity. The dosage of curcumin needed to stop bacterial growth was 260 mg/ml, creating a 14 mm inhibition zone. The ratio of isolates harboring the sul1 gene was 7/7 (100%) and HemO gene was 3/7 (42.8%). The Cytotoxic activity showed the bacteria was very toxic to normal human fibrocyte cells, with the highest percentage of death and lowest optical density, 68% and 0.25 O.D. respectively at a concentration of 100g/ml of bacterial filtrate. While optical density was recorded, half maximal inhibitory concentration (IC50) was 49.35. In conclusion Due to the high percentage of resistance to sulfonamide antibiotics in S. maltophilia, searching for new effective antibiotics may be an optimal therapeutic strategy for sul-carrying S.maltophilia infection, particularly in immunocompromised and critically ill patients. Immounocompromised patients are more possible to get infection with the opportunistic pathogen S.maltophilia, which can produce a wide range of antigens .

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب