التأثيرات المحتملة لمنشطات SIRT1 في التجلطات المرتبطة بمرض كوفيد-19

الباحث

علي هاني عباس

المشرف

انعام سامح عارف - بسمة طالب السوداني

الجامعة

الجامعة المستنصرية

الكلية / القسم

الصيدلة / الأدوية والسموم

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

SIRT1 activators;COVID-19;Coagulopathy;Platelet-rich plasma

ان امراض القلب والاوعيه الدمويه هي المسبب الرئيسي للوفيات حول العالم. تكون الخثرات هو احد الاحداث الفسلجية المرضية التي تحدث في امراض القلب الاقفارية. الجلطات الدمويه الوريديه مثل الجلطات الرئويه والجلطات الوريديه العميقه ممكن ان تحدث من اختلالات غير مرتبطه بالقلب والاوعيه الدمويه (مثل: السرطانء العدوى والجراحه). كوفيد-5١ هو جائحه وبائية منذ شهر اذار كوفيد-1١ هو مرض رئوي ناتج عن العدوى بفيروس SARS-CoV-2 سجلت الحالات التجلطيه (مثل الجلطات الرئويه) باعداد عاليه في مرض كوفيد-1 ١ كنتيجه للتخثر المنتشر داخل الاوعيه الدمويه او للتفاقمات المرضيه الاخرى المسببه لارتفاع الحاله التخثريه. تم دراسه عده عوامل ودورها في التخثر المتسبب به 9S 1-8 )6 ومن اهمها العامل المنشط للصفيحات الدمويه(41) و انزيمات الاكسده الحلقيه (COX) واوكسيد (NO) eb sill السيرتوينات هي انزيمات نازعه للأسيتيل مسؤوله عن عدة وظائف فسلجيه داخل الجسم. سيرتوين١ هو اكثر الانزيمات الذي اظهرت الدراسات ان له تأثير مضاد للتخثر. الدراسات اثبتت ان هنالك انخفاض في تعبير السيرتوين١ لدى مرضى كوفيد-5١. ان تفعيل انزيم السيرتوين١ يعتقد ان ينتج تأثير مضاد للتخثر gal مرضى كوفيد-1١. ان الابتامير BAS الخطي هو ابتامير تم تصميمه لتفعيل انزيم سيرتوين١ كمنشط انتقائي. الهدف من الدراسة: لبحث التأثير المتوقع لمنشطات سيرتوين١: BAS oI الخطي والريسفيراترول (كسيطرة موجبة) كمضادات للتخثر المتسبب به كوفيد-1١ في عينات بلازما لمرضى كوفيد-1١. كذلك لبحث دور كل من PAF, 511211, COX, NO في التخثر المتسبب به كوفيد-9١. كذلك البحث عن تأثير منشطات سيرتوين-١ المحتمل ضد التخثر فيما اذا كانت من خلال هذه المعلمات Ag gall طريقه العمل: تم جمع عينات دم لأشخاص اصحاء ولمرضى كوفيد-9١ وتم تحويل العينات الدموية الى عينات بلازما غنية بالصفيحات الدمويه PRP بشكل اوليء ثم تم اجراء خمس تجارب منفصله ومستقله وهي: النسبة المئوية لتكتل الصفيحات الدموية بواسطة التدفق الخلوي ، تعبير مستقبلات PAP ©، نشاط السيرتوين١ بواسطة تقنية .Westren blots ELISA اما 0023,7210تم حساب مستوياتهم بواسطة تقنيه ELISA وفي عينات كوفيد-1 ١ فقط, النتائج: النسبه المئويه لتكتل الصفيحات الدمويه تم تثبيطها بشكل كبير بواسطة منشطات سيرتوين١ في كلا العينات الاشخاص الاصحاء (المحفزه بواسطة منشطات الصفيحات الدمويه)(0.00001 > م) ومرضى S 19-28 (من 90175,5 الى 5,77 0/07) 0.0005 p< . منشطات السيرتوين١ ثبطت بشكل كبير PAFR في كلا العينات الاشخاص الاصحاء (المحفزه بواسطة (Carbamyl PAF )0.0001 >م)ومرضى كوفيد-9١ )0.0001 (p< مستوى LLG سيرتوين١ قد ارتفعت في كلا العينات الاشخاص الاصحاء (0.0001 (p< ومرضى كوفيد-1١ (0.0005 > (p بعد العلاج بمنشطات سيرتوين١. مستويات COK انخفضت بشكل كبير في عينات مرضى كوفيد1 ١ (كانت نسب COX مرتفعه لديهم في الاصل) 0.001 p< بعد العلاج بمنشطات سيرتوين١. مستويات 0[[سجلت ارتفاع بشكل كبير في عينات مرضى كوفيد-1 ١ (كانت المستويات منخفضه بشكل غير طبيعي لديهم) p< 0.001 بعد المعالجه بمنشطات سيرتوين١. في جميع النتائج اظهرت ال الابتامير BAS الخطي فعالية اعلى من ريسفيراترول، وكذلك فأن الابتامير 8,5 الخطي محتمل ان يعمل خلال ميكانيكيه عمل مختلفه عن الريسفيراترول بعد تنشيطه لسيرتوين١ مما ينتج في النهايه عن تأثير مضاد للتخثر. الاستنتاج: ان النتائج الرئيسيه المستحصله من هذه الدراسه كانت التأثير المضاد للتخثر لمنشطات سيرتوين١ (الابتامير الخطي بشكل رئيسي) بشكل عام وفي عينات كوفيد-9١ بشكل خاص. والتي اثبتت بواسطة قدرة منشطات سيرتوين١ لخفض تكتلات الصفيحات الدمويه، خفض تعبير مستقبالات منشط الصفيحات الدمويه، خفض تعبير انزيمات الاكسده الحلقيه و رفع مستويات اوكسيد النتريك وان جميع هذه التأثيرات هي نتيجة لتنشيط مستويات انزيم سيرتوين١ .كذلك ان جميع المستويات المسجلة لتلك المعلمات الحيويه هي جزء من الفسلجة المرضيه للتخثرات المستحثة بواسطه كوفيد-9١

Background: Cardiovascular diseases (CVD) are the main leading cause of death worldwide. Thrombus formation is the main pathophysiological event in all ischemic heart diseases. Venous-thromboembolism (VTE) like pulmonary embolism (PE) and deep venous thrombosis (DVT) can result from non- cardiovascular disorders (eg; cancer, infections and surgery). Thrombotic events (eg; pulmonary embolism) frequently reported in COVID-19 as a result of disseminated intravascular coagulation (DIC) or other disease progression that results in hypercoagulation. Many factors and mediators are investigated for its role in COVID-19 associated coagulopathy (CAC), most importantly Platelet activating factor (PAF), cyclooxegenase (COX) and nitric oxide (NO). Sirtuins are deacetylating enzymes responsible for many physiological role in the body. SIRT1 is one of the most investigated enzymes that have antithrombotic activity. Studies showed a downexpression of SIRT1 in COVID-19 patients. SIRT1 activation is thought to have antithrombotic activity in COVID-19 patients. The linear BAS aptamer is an aptamer designated as a SIRT1 selective activator. Aim of the study:  To investigate the potential effect of SIRT1 activators; linear BAS SIRT1 aptamer and resveratrol (as a control) against CAC in COVID- 19 plasma samples.  To study the involvement of PAF, SIRT1, COX and NO in CAC.  To investigate if the potential anti-CAC of SIRT1 activation effect by BAS aptmer was observed through these biomarker’s pathways. Methodology: Healthy human and COVID-19 patient samples were collected and processed into platelet rich plasma (PRP) samples initially, then five independent tests were performed; percentage of platelet aggregation measured by flowcytometry study, PAF receptor (PAFR) expression and SIRT1 activity was measured by ELISA and western blotting, COX and NO levels were calculated by ELISA techniques on COVID-19 samples only. Results: Percentage of platelet aggregation was significantly decreased by SIRT1 activators treatment in both healthy (induced by platelet activators) (p < 0.00001) and COVID-19 PRP samples (25.32% compared to COVID-19 group which is the percentage of platelet aggregation 74.4%) (p< 0.0005 ( . SIRT1 activators significantly supressed the PAFR expression in both healthy (induced by Carbamyl-PAF) (p< 0.0001) and COVID-19 PRP samples (p< 0.0001). SIRT1 activity recorded significant elevation in both healthy (p˂ 0.0001) and COVID-19 PRP samples )p ˂ 0.0005(. COX level was significantly decreased in COVID-19 PRP samples (COX level was abnormally elevated in COVID-19 samples) treated with SIRT1 activators (p˂ 0.001 ( . NO levels recorded significant increase after treatment of COVID-19 PRP samples (NO level was abnormally decreased in COVID-19 samples) with SIRT1 activators(p < 0.001) . In all results of the five studies linear BAS SIRT1 aptamer showed higher potency than resveratrol (0.5-1 μM vs 40 μM for resveratrol), and SIRT1 aptamer showed potential different sequenced post SIRT1 activation effect through mechanism of action resulted in its antithrombotic effects that may not involved in resveratrol induced SIRT1 activation. Conclusion: The main findings observed from the present study was the potential antithrombotic effect of SIRT1 activators (mainly the BAS aptamer) generally and in COVID-19 samples (potential anti-CAC effect) specially, which is proved through its ability to reduce the overall platelet aggregation, PAF receptors expression, COX expression and increase NO levels all these results are proved in a distinct test to be obtained through increasing SIRT1 activity by SIRT1 activators. Additionally PAFR overexpression, SIRT1 downregulation, COX overexpression and NO low levels are proved to be part of CAC pathophysiology in COVID-19 patient PRP samples.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب