دراسة جزيئية للمكورات العنقودية الذهبية المقاومة للميثيسيلين في مرضى قرحة القدم السكرية وتأثيرها على تركيز CD19 في الإنسان

الباحث

رواء عداي علي

المشرف

نبيل سالم سعيد تويج - أنغام جاسم محمد علي

الجامعة

جامعة الكوفة

الكلية / القسم

العلوم / علوم الحياة

الشهادة

دكتوراه

السنة

2022

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

MRSA;Diabetic foot ulcer;CD19;Molecular study

أجريت هذه الدراسة على مجموعة (112) فردًا من مختلف الجنس والفئات العمرية المسجلين في هذه الدراسة ، وتتكون من ثلاث مجموعات مدروسة وهي المجموعة الأولى ضمت )14( مريضًا مصابًا بقرحة القدم السكرية ، بينما ضمت المجموعة الثانية (VV) مرضى غير مصابين بالقدم السكري (السيطرة) والمجموعة الثالثة ضمت VV مشارك صحي (السيطرة) وتم استقدام جميع المرضى من مستشفى المرجان التعليمي ومستشفى الصادق في محافظة بابل وكذلك بعض المختبرات الطبية في النجف الاشرف خلال سبعة اشهر شباط الى اب (TTY) تراوحت أعمار المرضى بين (Ae - 7١( سنة لكلا الجنسين. لم تظهر الدراسة فروق GIS دلالة إحصاتية بين السكري مع قرحة القدم والسكري بدون قرحة القدم ومجموعة الاصحاء فيما يخص العمر والوزن والجنس 0.05 < م بينما الامراض المرافقة (الأمراض المزمنة) ، أظهرت النتائج أن أكثر تكررا في مرضى السكري قرحة القدم 57.17 / من مرضى السكري - غير قرحة القدم V+ VY) /) مع وجود فرقات معنوية كبيرة (0.05> 2) . كان حدوث قرحة القدم DM أكثر شيوعًا في المناطق الريفية (55/) مقارنة بالمناطق الحضرية (775) بينما كانت نسبة الإصابة بقرحة القدم في المناطق الحضرية أكثر Le gus (755.5) من الريف (LYE) مع فروقات معنوية. (0.05> 2). كانت Bae مرض السكري أطول معنويا في DM المصابة بقرحة في all حيث )218( من المرضى في هذه المجموعة كانت مدة المرض لديهم> Lale ١١ مقارنة ب )+71( فقط من المرضى الذين كانت Bre المرض لديهم il من ٠١ سنوات ، ( 0.05> 2). كان إجمالي ٠١ عينة نمو جرثومي إيجابي. معظم العزلات ££ (727.7/) عبارة عن بكتيريا موجبة الجرام ممثلة ب )/5١.1١( FV من العزلات تم تحديدها على أنها Staphylococcus aureus بينما الأنواع الأخرى تمثل © )%.4( Sepidermis و" (ZV) من العزلات إلى Streptococcus spp بينما كانت البكتيريا سالبة الجرام المتبقية ١5 (5.5”/) في مريض DFU اشتملت الدراسة الجزيئية على فحص بكتريا aureus .5 المقاومة للميئيسيلين باستخدام Bale أولية محددة من جين mecA وكشفت أن 60/77 (751.5) من عزلات المكورات العنقودية الذهبية كانت ”50/7 (*.757) من mecA المورثة مسجلة على أنها MRSA تراوحت أعمار المرضى بين (A618) سنة لكلا الجنسين والفئة العمرية )10-51١( سنة كانت أعلى نسبة إصابة ١١ (75.5/) بينما كانت الفئة العمرية -1١( Jal (A+ إصابة. معدل ¥ (73.5). تم اختبار حساسية للمضادات البكتيرية ل" عزلة من MRSA لعقار البنسلين تصل إلى )/7٠١( YY . بالإضافة إلى ذلك ، أظهرت نتائج الحساسية المضادة للبكتيريا معدل مقاومة مختلف بين عزلات MRSA لعقار التتراسيكلين ودواء الدوكسيسيكلين وصل إلى )/5٠0.1( ١7 و 5 )/١5.5( على التوالي بينما كان معدل المقاومة للأزيثروميسين والإريثروميسين YY (758.7). في الوقت نفسه 6 كانت معدلات النورفلوكساسيلين ، الكليندامايسين ، النيتروفورانتوين مختلفة لتصل إلى 5 VY ٠ )7١4.9( (755.5) و7١ (50307.5/) على التوالي. 7) و (VOT) VY و١١ (5372.5/) على التوالي ودرجات المقاومة بين المكورات العنقودية الذهبية المعزولة تجاه عقار الجنتاميسين كانت 1 )/78.١( بينما )/72١.8( YY من العزلات كانت وقد لوحظت الدراسة أن عقار الكلورامفينيكول له تأثير جيد ضد العزلات الإكلينيكية للمكورات العنقودية الذهبية ، حيث ظهر مقاومة أضعف بلغت ” )79.0( ومع ذلك ، كانت درجات المقاومة بين بكتيريا S. aureus المعزولة تجاه أدوية Trimethoprim و YY 5 Z() .¥) )* 5 gentamicins rifampin (ZVA.)) 9 5 (1A) على التوالي. تم تسجيل Multiple Antibioytic Resistane في طيف لاثنان امن العز لات من WS. aureus أظهرت بيانات PCR ارتفاع معدل جينات 071 و TIT ع4 على نطاقات موجبة ٠9/؟” (AVVO) عند 55١ نقطة أساس و TY) 57/١9 746( نطاقات موجبة عند PVT نقطة أساس على التوالي. لم يتم الكشف عن جينات 11 agr و ager IV لوحظت النتائج 7/75" sen A(ZAV YO) عند YOA زوج قاعدي ، وجينات رح عند 5٠١ زوج قاعدي. 77/9١ Laine (737.87) لجين sak عند 7١7 زوج قاعدي وجينات ebps عند 5٠5 زوج قاعدي. اشتملت الدراسة المناعية على فحص مستوى CD19 و CD4 في مصل المرضى باستخدام تقنية FELIS A أوضح فحص مستوى 01019 انخفاضًا معنويا في مستوى CD19 لقرحة القدم DM مقارنة JS من قرحة القدم غير DM ومجموعات التحكم الصحية ، ( 0.05> (P Li بالنسبة للجنس والأمراض المصاحبة ، فلا يوجد تأثير للعلاج على CD4 و CD19 في كل منهما DM) مع تقرح القدم و -DM من غير تقرح القدم ومجموعات الاصحاء). أظهر تحليل الارتباط ثنائي المتغير أنه لا يوجد ارتباط معنوي لكل من CD4 و CD19 مع العمر والوزن فيما يتعلق بكلا من مجموعات (السكري بدون قرحة القدم والاصحاء) بينما بين مرضى السكري قرحة القدم تم العثور على ارتباط معنوي وكان ذلك معكوس (سلبي) ل CD19 و CD4 مع العمر (555 R=-+, و01... (P.Value = ٠ .٠٠05هو 2 - ٠. WY)5(P.Value = ٠ على التوالي ، ولا يوجد ارتباط مع الوزن والفئة العمرية > 1١ عامًا في مجموعة قرحة القدم DM أظهروا انخفاضًا معنويا في مستوى CD19 و CD4 مقارنة JS من قرحة القدم غير DM والتحكم بصحة جيدة مع اختلاف معنوي. (2>0.05). كما ظهرت أعلى نسبة للمرضى المصابين بالصنف الثاني (57.7/) ، يليها االصنف الثالث CAVES) الصنف الرابع )290.6( ، الصنف الأول )77١.7( والصنف الخامس (5.2/) مع اختلاف معنوي . P< 0.05( أظهرت الدراسة أن مستوى CD19 و CD4 في مجموعات الأرانب (بعد تحريض الإصابة بالبكتريا العنقودية الذهبية المعزولة عن مرضى قرحة القدم السكرية) انخفض معنويا مقارنة بمجموعتي الأرانب Gul YI, السليمة (قبل الإصابة).

This study was conducted on a total of 112 individual in different sex and age group cases composed of three studied groups namely, first group included (60) Diabetes mellitus patients with diabetic foot ulcer (DFU) , the second group included (26) DM patients without diabetic foot (Control) and the third group included 26 health participants (Control) group .All patients were recruited of the Marjan Teaching Hospital, Al-Sadiq Hospital in Babylon Province as well as some clinical laboratories in Al-Najaf City within the time seven months from February to August (2021). The ages of the patients were ranged from (30 – 80) years for both sexes. The study displayed no statistically significant difference among DM- foot ulcer , DM-non foot ulcer and healthy control groups in age ,weight ,sex (p ˃ 0.05) .As for the comorbidity (history of chronic diseases), the results showed DM- foot ulcer patients were more frequent (66.7%) than DM -non foot ulcer patients (30.7%) with significant differences (P<0.05). The residence of DM- foot ulcer was more common in rural (65%) compared to urban (35%) while the DM -non foot ulcer in the urban has more percentage (65.4%) than the rural (34.6%) with significant differences (P<0.05). The duration of DM was significantly longer in the DM with foot ulcer where (64%) of patients in this group had disease duration of >15 years compared to only (60% ) of patients had a disease duration of DM<10 years, (P < 0.005) . The total 60 specimens were positive bacterial growth 44 (73.3%) were Gram positive bacteria represented by 37(61.1%) of the isolates were identified as Staphylococcus aureus while others isolates which represented by 5 (8.3%) S. epidermides and 2 (3.3%) of isolates return to Streptococcus spp., while the remaining Gram negative bacteria were 16 (26.6. %) in the DFU patient. The molecular study involved screening of methicillin-resistant S. aureus by using specific primer of mec A gene and revealed out of 37/60(61.6%) S. aureus isolates were 32/60(53.3%) harbored mec a gene recorded as MRSA .Also PCR data revealed high rate of agrI and agrIII genes involved 30/32 (93.75%) positive bands at 441 bp and 29/32(90.62%) positive bands at 323 bp respectively. There were no detection to agarII and agarIV genes. Results observed 26/32(81.25%) for scn at 258 bp. , chip genes at 410 bp. , while 31/32(96.87%) for sak gene at 223 bp and ebpS genes at 506 bp . The susceptibility of antibacterial 32 clinical isolates of MRSA to penicillin's drug reaching to 32(100%) additionally to tetracycline, doxycycline drug reaching to13 (40.6%) and 5(15.6%) respectively while resistance rate of azithromycin and erythromycin were 22 (68.7%). At the same time, norfloxacillin , clindamycin and nitrofurantoin were different rates reach to 6(18.7%), 21(65.6%) and 12(37.5%) respectively. Furthermore, the degrees of resistance for norfloxacillin, clindamycin and nitrofurantoin were 6(18.7%), 21(65.6) and 12(37.5%) respectively and the degrees of resistance among S. aureus isolated to ward gentamicin drug were 9(28.1%) while 23(71.8%) of isolates were sensitive. The study noticed that Chloramphenicol drug have a good effect against clinical isolates of S. aureus because it appeared weaker resistance reached to 3(9.3%). The Multiple Antibiotic Resistance was recorded 1 at large spectrum for two isolates S. aureus . The immunological study included investigation of the level of CD19 and CD4 in patients serum by using ELISA technique. The investigation explained a significantly lower in CD19 and CD4 level in DM- foot ulcer compared with both DM non - foot ulcer and healthy control groups (P<0.05). The bivariate correlation analysis showed that there is no significant correlation for each CD4 and CD19 with age and weight with respect to both (DM –non foot ulcer and healthy control groups) while among DM - foot ulcer patients significant correlation had been found and it was a inverse (negative) for CD19 and CD4 with age (R= - 0.454, P.Value = 0. 0.009 ; R= -0.672 , P.Value =, 0.005,) respectively, and no correlation with the weight and the age group > 61 years within the DM-foot ulcer group patients showed significantly decreased in CD19 and CD4 level compared to both DM-non foot ulcer and controls healthy with a significant difference .P-value <0.05. Also, the highest percentage of infected patients appeared with Grade 2 (43.3%), followed by Grade 3 (23.3%), Grade 4 (15.0%), Grade 1 (11.7%) and Grade 5 (6.7%) with significant difference ,P-value <0.05. The study showed that the level of each CD19 and CD4 in rabbits groups (after inducing the infection by S. aureus isolated from diabetic foot ulcer patients) were significantly decreased compared with both the healthy control rabbits and rabbits groups( before the infection) P <0.05, while we noticed that no significant difference between the rabbits groups of healthy control and before infection (P>0.05).

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب