دراسة فسلجية جزيئية لتأثيرات كيسبيبتن-10 ضد السمية القلبية الوعائية المستحدثة بواسطة كلوريد الكادميوم في ذكور الجرذان

الباحث

زهراء ثامر علي

المشرف

أ.م. محمد طه نقي البياتي

الجامعة

جامعة الكوفة

الكلية / القسم

الطب البيطري / الفسلجة البيطرية

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

Kisspeptin-10;Cadmium Chloride;Cardiovascular Toxicity;Male Rats

الكيسبيبتين-10 هو بروتين قادر على تغيير بنية خلايا عضلة القلب والبنيات التي تضررت بفعل كلوريد الكادميوم والتي تؤثر على القلب وأنسجة الجسم وأبرز آثاره هي القدرة على إحداث خلل في وظائف القلب بسبب المستوى الجزيئي للعلاج بالكادميوم. في الضرر التأكسدي للحمض النووي والدهون والبروتينات كخلل في نظام الأكسدة المضاد للأكسدة مما يؤدي إلى تلف أنسجة القلب . تم تطوير الدراسة من أجل الكشف عن الآثار الفسيولوجية والجزيئية لاستخدام الكيسبيبتين -10 في علاج ضعف الجهاز القلبي الوعائي. استخدم في التجربة 40 جرذ من الذكور تبلغ من العمر 24 اسبوعا وتتراوح اوزانهم بين (350-250 جم) مقسمة إلى مجموعتين تجريبيتين كما يلي :- مجموعة السيطرة (-) 10جرذان تركت دون أي علاج حيث تم التضحية بخمسة منها بعد مرور اسبوعين والاحتفاظ بالخمس جرذان المتبقية كمجموعة سيطرة (-) Ledge احتوت المجموعة التجريبية الثانية على 30 جرذ حيث تم استخدم كلوريد الكادميوم عن طريق الحقن داخل الصفاق (1مجم/كجم) مرة واحدة اسبوعيا لمدة اسبوعين حيث تم التضحية ب5جرذان منها (مجموعة كلوريد الكادميوم). أما 25 جرذ المتبقي تم تقسيمها الى Cle pane} : مجموعه السيطرة )+( والتي تحتوي كجرذان والتي استخدم فيها كلوريد الكادميوم ولم تعالج بمادة الكيسبيبتين-10 . مجموعة الكيسبيبتين 20 نانومول Cus اعطيت هذه المجموعة مادة الكيسبيتين 20 نانومول /حيوان عن طريق الحقن تحت الجلد لكل حيوان كل 72 ساعة ولمدة 30 يوم. أما المجموعة الاخيرة هي مجموعة الكيسبيبتين 40 نانومول حيث اعطيت هذه المجموعة كيسبيبتين40 نانومول/حيوان عن طريق الحقن تحت الجلد كل 72ساعة ولمدة 30 يوم ثم يتم قياس المعايير التالية لكل المجموعات :الاختبار الجزيئي باستخدام التعبير الجيني كاسبيز3.سرعة تثفل الكريات, فحص الدهون الشامل (الكوليسترول . البروتين الشحمي الخفيض الكثافة. البروتين الشحمي المرتفع AALS ثلاثي الغليسريد) و الاختبار النسيجي للقلب بصبغة ( الهيماثكسلين والايوزين ) اظهرت نتائج الاختبار الجزيئي للتعبير الجيني لعينات الابهر اظهرت زيادة معنويه على مستوى (PS0.05) في مجموعة الكيسبيبتين 20نامول بالمقارنة مع مجموعة السيطرة (-) بمتوسط(42.71) ومجموعة السيطرة )+( بمتوسط )32.18 ) ومجموعة كلوريد الكادميوم بمتوسط (43.05) كما اظهرت نتائج مجموعة الكيسبيبتين 40 نامول زياده معنوية على مستوى (P<0.05) بالمقارنة مع مجموعه السيطرة (-) بمتوسط )40.1( تم تقدير مستوى سرعة تثفل كريات الدم الحمراء وقد اظهرت زيادة معنوية على مستوى (PS0.05) في مجموعة كيسبيبتين 40 نانومول بمتوسط (20.50ملم/ساعه) بالمقارنة مع مجموعه السيطرة(-) leben sir) 7.50) ومجموعة السيطرة(+) والتي كان متوسطها (7.33) | بينما كان هناك زيادة معنويه على مستوى (P<0.05) في مجموعة الكيسبيتين 40 نانومول بمتوسط (12.77ملم/ساعة ) مقارنة مع مجموعة السيطرة (-). أظهرت نتائج فحص البروتين الشحمي الخفيض الكثافة زيادة معنوية على مستوى (5>0.05) في مجموعة كلوريد الكادميوم بمتوسط (50.69مجم/ديسيلتر) مقارنة مع مجموعة الالسيطرة (-) بمتوسط (28.35 مجم/ديسيلتر) Lin كان هناك انخفاض معنوي على مستوى (2>0.05)في مجموعة كيسبيبن 0نانومول بمتوسط (38.13مجم /كجم ) ومجموعة كيسبيبتين 40نانومول بمتوسط (29.03 مجم/ديسيلتر) بالمقارنة مع مجموعة الالسيطرة )+( والتي كان متوسطها )67.34 مجم/ديسيلتر). كما واظهرت نتائج فحص البروتين الشحمي المرتفع الكثافة وجود انخفاض معنوي على مستوى (PS0.05) في مجموعة كلوريد الكادميوم بمتوسط (116.38مجم/ديسيلتر) بالمقارنة مع مجموعة السيطرة (-) والتي كان متوسطها (174.55مجم/ديسيلتر) وايضا كان هناك انخفاض معنوي في مجموعة الكيسبيبتين 20 نانومول بمتوسط (117.46مجم/ديسيلتر) مقارنة مع مجموعة السيطرة (-).اظهرت الاختبارات النسيجية لمجموعة كلوريد الكادميوم وجود اختلاف في ترتيب مجاميع الالياف لعضلات القلب وذلك بسبب تحطم الخلايا القلبية والذي نتج عنه تكون فراغات مليئة بحطام الخلايا بينما كان هناك استجابة واضحة للنسيج القلبي عند العلاج بمادة الكيسبيبتين-10 والتي تمثلت في امتلاء فراغات الانسجة المحطمة بالألياف عندما عالجنا الجرذان بجرعة 0نانومول/حيوان في حين عودة النسيج الى شكله الطبيعي تقريبا من حيث ترتيب الالياف القلبية وملاحظه تقلصها في المناطق المتضررة عنما استخدمت جرعة 40 نانومول/حيوان . أظهرت نتائج الدراسة الحالية أن الكيسبيبتين له تأثير إيجابي على نظام القلب والأوعية الدموية عن طريق الحد من تلف الخلايا السامة الذي يسببه كلوريد الكادميوم في القلب ¢ كما أن الكيسبيبتين -10 يقلل من مستوى البروتينات المخفضة الكثافة . الاختلاف في جرعة الكيسبيبتين -10 له تأثير انعكاسي على مدى استجابة الجسم للعلاج وفقًا لتركيزه المستخدم .

Kisspeptine-10 is a protein that capable to change myocardial cell structure and architectures that damaged by cadmium chloride which effect on heart and tissues of the body and the most prominent of effects are the ability to induce cardiac dysfunction because the molecular level of cadmium treatment resulted in oxidative damage to DNA ,lipids and proteins as an imbalance in oxidant- antioxidant system resulting damage in cardiac tissue. The study was developed in order to reveal the physiological and molecular effects of the use of kisspeptine -10 for the treatment of impairment of the cardiovascular system . In this study were used forty male Albino rats 24 weeks weighing (250– 350)gm divided into two experiment groups: control negative group (10 males rats untreated ), 5rats for sample collect after two weeks and 5 males kept males giving cadmium chloride at dose 1mg/kg of body weight intra-peritonealy once weekly for two weeks, 5 rats for sample collect after two weeks (cadmium chloride group) and 25 rats from the experimental group will be divided into three groups: control(+) group 5 rats untreated with kisspeptine, (20 nmol/animal group) 10 rats will be treated with 20 nmol/animal of kisspeptid subcutaneously every 72 hour for 30 days and finally kisspeptine 40 nmol/animal group 10 rats will be treated with 40 nmol/animal of kisspeptid subcutaneously every 72 hour for 30 days. The parameters for the all groups which are : Molecular determination (Caspase III) Real-Time RTqPCR for all groups, erythrocyte sedimentation rate , determination of lipid profile before and after uses of kisspeptine (Total cholesterol ,high density lipoprotein, low density lipoprotein, triglycerides) and Histopathological study of the heart (Hematoxyline and Eosine staining). The results of gene expression for the aortic sample showed that the significant at (P≤0.05) increase KP(20nmol)group in comparisons to all groups: control(-) group(Mean,42.71), control (+)group(Mean, 32.18) ,cadmium chloride group(Mean, 43.05) and finally kisspeptine- 40nmol group(Mean,40.1),while there is a significant at (P≤0.05) increase in the control (+)group compared to the control (-) group(Mean,10.5). Determination of erythrocyte sedimentation rate of the blood samples used in this study show that there was a significant at (P ≤0.05) increase in the kisspeptine 40nmol group (Mean,20.50)mm/h compared to the control(-) (Mean,7.50)mm/h and control(+)group (Mean,7.33) mm/h. While there was a significant at (P≤0.05) increase in the kisspeptine 20nmol group (Mean,12.77)mm/h compared with the control (-) group. The results of low density lipoprotein levels showed that there was a significant at (P≤0.05) increase in cadmium chloride group (Mean,50.69)mg/dl compared with control(-) group(Mean,28.35)mg/dl. There was a significant at (P≤0.05) decrease in the KP20nmol group (Mean, 38.13)mg/dl and KP40nmol/kg group (Mean,29.03)mg/dl compared with the control(+) group (Mean,67.34) mg/dl. The results of high density lipoprotein level showed that there was a significant at (P≤0.05) decrease in cadmium chloride group(Mean,116.38)mg/dl compared with control(-)group(Mean,174.55) mg/dl. There was also a significant at (P≤0.05) decrease in the kisspeptine 20nmolgroup (Mean,117.46) mg/dl compared with control(-)group . The histopathological lesion of cadmium chloride group that observed in the tissues represented by disarrangement of myofibril array ,cells formed a space that filled with cell debris was observed. The histological results of kisspeptine showed deposition of fibrous tissue in the cardiac parenchyma where there fibrous filled the spaces of the destructed tissue when treated rats with kisspeptine- 20nmol/animal and when treated with kisspeptine 40 nmol/animal the histopathological results showed the normal cardiac myofibril architecture note the contraction of myofibril was observed in the affected area. Conclusion of the current study is kisspeptine has a positive effect on the cardiovascular system by reducing toxic cell damage that caused by cadmium chloride in the heart also kisspeptin-10 lowered the level of LDL lipids. difference in the dose of Kisspeptine-10 has a reflexive effect on the extent to the body's response to treatment according to the concentration of kisspeptine-10.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب