دراسة نسيجية مرضية وجزيئية لتأثيرات مستخلص أوراق الهندباء المائي وجزيئات الهندباء والفضة النانوية على جرذان الوستر المصابة بداء السكري

Histopathological and Molecular Study on Effects of Dandelion Leaf Aqueous Extract and Dandelion Silver Nanoparticles on Diabetic Wister Rats
البحث في الرسائل
الباحث
صابرين صبري محسن
المشرف
أ.د. بشرى حمزة فارس; د. وسناء محمد عبد الرضا
الجامعة
جامعة الكوفة
الكلية / القسم
الطب البيطري / الأمراض البيطرية
الشهادة
ماجستير
السنة
2022
لغة الرسالة
انكليزي
الكلمات المفتاحية
Dandelion;Silver Nanoparticles;Diabetes Mellitus;Histopathology

الملخص

تناولت الدراسة الحالية التأثيرات المضادة لمرض السكري للمستخلص المائي لأوراق الهندباء وجزيئات الفضة النانوية على جرذان ويستر البيضاء المصابة بداء السكري على المستويين النسيجي المرضي والجزيئي ، ومقارنتها بالأنسولين. تم تحضير جزيئات الفضة النانوية بالطريقة الكيميائية الخضراء باستخدام المستخلص المائي لاوراق الهندباء كعامل اختزال ، مما أدى إلى اختزال نترات الفضة (AgNO) إلى دقائق الفضة النانوية. يتم تأكيد التركيب والحجم والتشكل البلوري لجسيمات الفضة النانوية عن طريق الأشعة فوق البنفسجية وتقنية المسح الإلكتروني المجهري والأشعة السينية المشتتة للطاقة وحيود الأشعة السينية على التوالي. تم الكشف عن تكوين واستقرار AgNPs المختزل في المحلول الغرواني باستخدام التحليل الطيفي المرئي للأشعة فوق البنفسجية ، وتظهر ذروة الامتصاص عند 45٠ نانومتر مما يشير إلى رنين البلازمون السطحي المحدد ل AgNPs أظهر مجهر المسح الإلكتروني أن AZNPs لها شكل كروي مع حجم محدد يتراوح من ١5( إلى he gil (VA يتم استخدام تقنية التحليل الدقيق للأشعة السينية المشتتة للطاقة (EDS) لتحديد العناصر المكونة للمحلول الغروي. تم اختبار التوصيف الكيميائي للتوليف AgNPs باستخدام تقنية حيود الأشعة السينية ، والتي توضح أن متوسط الحجم البلوري كان ple gil )١5( ، والجسيمات النانوية الفضية التخليقية لها بنية متعددة البلورات. يعد تطبيق الجسيمات النانوية في الطب اقتراحًا جذابًا. اشتملت الدراسة الحالية على Ye أنثى من جرذان ويستر البيضاء وزنها ٠١ + 7٠٠١ جرام. تم تقسيم الحيوانات عشوائياً إلى خمس مجموعات JS) مجموعة = (VY على النحو التالي: المجموعة الأولى كضابطة صحية غير مصابة بالسكري (سلبية السيطرة) لم تتلق أي نوع من العلاج. عولجت المجموعات الأخرى داخل الصفاق مرة واحدة ب ٠0 ملجم / كجم من وزن الجسم من الستربتوزوتوسين ، ثم عندما أصبحت هذه الجرذان تعاني من ارتفاع السكر في الدم ، تم تقسيمهم إلى أربع مجموعات. المجموعة الاولى (مجموعة السيطرة الإيجابية) لم تتلق أي نوع من العلاج. المجموعة الثانية (مجموعة الانسولين): عولجت بجرعة يومية من الأنسولين المخلوط ؟ وحدة / كجم وزن حي تحت الجلد.المجموعة الثالثة (مجموعة الهندباء): عولجت بجرعة يومية عن طريق الفم بمستخلص أوراق الهندباء 7١ ملجم / كجم من وزن الجسم. المجموعة الرابعة (مجموعة الهندباء_ جزيئات الفضة النانوية): عولجت بجرعة يومية داخل الصفاق بجزيئات الهندباء الفضة النانوية 2.5 pale / كجم من وزن الجسم لمدة 5 أسابيع. في نهاية التجربة اخذت عينات الأنسجة من البنكرياس والكبد والكليتين والحصين من جميع المجموعات لدراسة التغييرات النسيجية. أظهر فحص الأنسجة المرضية للبنكرياس والكبد والكلى والحصين لدى الجرذان المصابة بداء السكري وجود تغييرات في الجرذان المصابة بداء السكري المستحث بالستربتوزوتوسين. في غضون ذلك ٠ يتغلب العلاج بالأنسولين ومستخلص أوراق الهندباء ودقائق الفضة النانوية على هذه التغييرات. تميل غالبية الخلايا إلى أن تكون طبيعية ، وقد يفسر هذا التحسن في الخلايا الى التأثير المضاد لمرض السكري لمستخلص أوراق الهندباء وجزيئات الفضة النانوية المحضرة بالطريقة الكيميائية الخضراء. أجريت الدراسة الجزيئية باستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي (RT-qPCR) لتحديد مستوى التعبير الجيني لعامل النمو الشبيه بالأنسولين ١ وعامل النمو الشبيه بالأنسولين ١ في أنسجة الحصين في المجموعات المدروسة. كانت النتائج كالتالي: كان التعبير عن 16171 منخفض انخفاضًا معنويًا في المجموعة المصابة clay السكري (إيجابي الضبط) مقارنة بالمجموعة العادية (السلبية الضابطة) Lain ، (p<0.05) ارتفع التعبير عنه ارتفاعا معنويا في المجموعة المعالجة بالأنسولين مقارنة بالمجموعة الإيجابية الضابطة ( (p<0.05 ، بينما لا يوجد فرق معنوي في التعبير عن IGF] في المجموعات المصابة clay السكري المعالجة بمستخلص أوراق الهندباء و AgNPs عند مقارنتها بالمجموعة الإيجابية الضابطة (0<0.05). كان التعبير عن TGF2 منخفض انخفاضًا gine في المجموعة الإيجابية الضابطة عند مقارنتها بالمجموعة السلبية الضابطة (0>0.05) ٠ كما كان هناك انخفاض معنوي في مجموعات الأنسولين وجسيمات الفضة النانوية والهندباء مقارنة مع المجموعة السلبية الضابطة (P<0.05) في الختام ، يحتوي مستخلص أوراق الهندباء وجزيئات الفضة النانوية على تأثيرات مضادة للأكسدة ومضادة للسكري ضهرت بشكل واضح في الفحص المرضي للنسيج ، مشابهة لتأثيرات الأنسولين ، في حين أنه ليس لهما تأثير كبير على التعبير عن جينات 16171 و IGF2 ومع ذلك ، هناك dale إلى مزيد من البحث لمعرفة الآليات الدقيقة لمستخلص اوراق الهندباء وجزيئات الفضة النانوية المسؤولة عن الأنشطة المضادة لمرض السكري وزيادة البحث عن علاجات محسنة مضادة لمرض السكري كمحاولة للقضاء على الآثار الجانبية المرتبطة بحقن الأنسولين.

Abstract

The present study was conducted the antidiabetic effects of dandelion leaf extract and silver nanoparticles on diabetic wister rats via histopathological and molecular levels, and compared them with insulin. Silver nanoparticles were prepared by the green chemistry method using dandelion leaf aqueous extract as capping and reducing agent, which reduced Silver nitrate (AgNO3) into silver nanoparticles. The morphology, size and crystalline structure, of silver nanoparticles are confirmed by ultraviolet, Scanning electron microscope technique, energy-dispersive spectroscopy and X- ray diffraction respectively. The formation and stability of the reduced AgNPs in colloidal solution were detected and monitored by using UV-visible spectroscopy, and the absorption peak appeared at 450 nm indicating the specific surface Plasmon resonance of AgNPs. The Scanning Electron Microscope showed the AgNPs have spherical shape with particular size ranging from 14 to 28 nm, Energy dispersive spectroscopy (EDS) technique was used to determine the elemental composition of the colloidal. The chemical characterization of synthesized AgNPs was tested using the X-ray diffraction technique, which shows that the average crystalline size was 16nm, and the synthesized silver nanoparticles have a polycrystalline structure. The present study included 35 female wistar albino rats weighting 200±20 grams. Animals were assigned randomly into five groups, (n = 7) as follows: the first group as healthy non diabetic control (control negative ) did not receive any type of treatment. The other groups were treated intraperitoneally once with 50 mg/kg of b.w of streptozotocin, when these rats became hyperglycemic, they were divided into four groups as follows: Diabetic group (control positive ) did not receive any type of treatment, (Insulin group):Diabetic rats were treated with mixed insulin at daily dose of 2 units/kg b.w subcutaneous route, (Dandelion group):Diabetic rats treated with dandelion leaf equeous extract at daily dose of 30mg/kg of b.w, orally route, (D-AgNPs group): Diabetic rats treated with dandelion silver nanoparticles at daily dose of 2.5mg/kg of b.w. IP route, the period of the experiment was 4 weeks. At the end of the experiment, tissue samples were collected from the pancreas, liver, kidney, and hippocampus of all groups for histopathological study. Histopathological investigation of pancreas, liver, kidney and hippocampal tissues of diabetic rats represented the presence of changes in rats with induced diabetes by streptozotocin. While treatment with insulin, dandelion leaf extract and AgNPs reduce these changes. The majority of the cells tend to be normal, this improvement in the cells may explain the antidiabetic effects of dandelion leaf extract and silver nanoparticles prepared by the green chemistry method.The molecular study was carried out by using Real-Time PCR technique (RT-qPCR) to determine the level of gene expression of insulin -like growth factor 1 and insulin- like growth factor 2 in hippocampal tissues of the studied groups. The results were as follows: the expression of Igf1 decreased significantly in the diabetic group (positive control) compared to the normal group (negative control) (p < 0.05), while its expression showed a significant increase in the insulin-treated group compared with the positive control group (p < 0.05), while there was a non-significant increase in the expression of Igf 1 in the diabetic groups treated with dandelion leaf extract and AgNPs when compared to the positive control group (p>0.05). The expression of Igf 2 was significantly decreased in the control positive group when compared with the control negative group (p< 0.05). It was also significantly decreased in the insulin, silver nanoparticles, and dandelion treated groups compared with the control negative group (p< 0.05).

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.