التشخيص المظهري والجزيئي لبعض مسببات مرض تبقع أشجار الحمضيات في مناطق الفرات الأوسط ومقاومتها أحيائياً

الباحث

شروق علي محمد الربيعي

المشرف

أ.د. صباح لطيف علوان

الجامعة

جامعة الكوفة

الكلية / القسم

الزراعة / وقاية النبات (أمراض نبات)

الشهادة

دكتوراه

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

تبقع الحمضيات;التشخيص الجزيئي;المكافحة الأحيائية;الفرات الأوسط

هدفت الدراسة الى استعمال مستخلص نبات الطرفة والبكتريا subtilis .8 في مكافحة مرض التبقع في الحمضيات ، كما تضمنت الدراسة عزل وتشخيص الفطر المسبب لمرض التبقع على الحمضيات في ثلاث محافظات هي بابل و كربلاء والنجف معروفة بزراعة الحمضيات (البرتقال والليمون واللالنكي و النارنج ) للفترة من Glas 2019 الى نيسان 2021، اظهرت النتائج ان جميع البساتين التي تم مسحها مصابة بمرض التبقع وبنسب تراوحت مابين 9065-32. اظهرت نتائج العزل والتشخيص لمائة عينة من اغصان واوراق وسيقان وثمار لاشجار الحمضيات وجود bac اجناس فطرية وهي spp. 41167710710 و Fusarium 3 Aspergillus و Penicillium و Geotrichum و Colletotrichum بنسبة تردد تراوحت مابين 99069.35-1.61 في العينات المختبرة ، اذ بلغت نسبة تواجد الفطر 69.35Alternaria 90 وبذلك يكون الفطر Alternaria spp. اكثر الفطريات تواجدا لجميع العينات المختبرة . اظهرت نتائج التشخيص الجزيئي للفطر ان الفطر المسبب للمرض هو Alternaria وباستخدام تقنية الترحيل الكهربائي لنواتج تفاعل البلمرة التسلسلي PCR تبين وجود ثلاثة انواع من الحزم مرتبطة ارتباط وثيق بالانواع destruens ,4. alternata, A. tenuissima .4. كشفت نتائج القدرة الامراضية مختبريا لعزلات الفطر Alternaria انها ool الى اصابة الثمار وبدرجات متفاوتة وقد انبت الاختبار ان جميع العزلات كانت ممرضة الا ان هناك تباين بشدة اصابتها للثمار للانواع الاربعة (برتقال ،ليمون ،لالنكي؛ نارنج) حيث نفذت التجربة بطريقتين رش العالق الفطري على الثمار السليمة وحقن العالق الفطري وللانواع الفطرية الثلاثة Alternaria 0116171010, Alternaria destruens, Alternaria 60 حيث Gin النتائج ان رش العالق الفطري على ثمار البرتقال السليمة ادى الى ظهور التبقعات بمعدل اقطار مختلف بين الانواع الفطرية اذ بلغ 4,67 ملم للفطر UIA, alternata حقن العالق الفطري للنوع نفسه بلغ 2.33 سم اما بالنسبة لثما راللالنكي فقد بلغت اقطار البقع عند رش العالق الفطري للفطر A. alternata 10.83 سم اما للحقن بلغت 9.7 سم وكذلك لثمار الليمون بلغت اقطار البقع للرش 15.6 ملم وللحقن 2 سم ءاما بالنسبة لثمار النارنج بلغت للرش 10 ملم وللحقن 6.3 سم. بينت نتائج اختبار النسبة المئوية للاصابة باستخدام شتلات الحمضيات بعمر سسنتين في الاصص تحت ظروف شبيهة بظروف الظلة الخشبية اظهرت فرقا معنويا كبيرا بالنسبة لمعاملة المقارنة وايضا بالنسبة لانواع الفطر وايضا ابدت تباين في نسبة الاصابة بين انواع الحمضيات الاربعة اذ كانت النسبة المئوية للاصابة بالفطر A. alternata على البرتقال 9625 و 990100 على اللالنكي والليمون والنارنج | لكل منهم ونسب اقل للاصابة بالفطر A. tenuissima .كشفت نتائج التجربة الحقلية لتقييم النسبة المئوية لشدة الاصابة على شتلات الحمضيات بعمر سنتين تحت ظروف شبيهة بظروف الظلة الخشبية ان اللالنكي هو الاكثر تاثرا بالاصابة اذ بلغت النسبة المئوية لشدة الاصابة بالفطر A. alternata بلغت %60 و9/75 للفطر A. destruens و للفطر A. tenuissima %64. أظهرت نتائج تجربة تاثير درجات الحرارة المختلفة على النمو القطري Alternaria bill بانواعه الثلاثة للايام الثلاثة الاولى من النمو حيث بلغ معدل النمو الفطري للفطر alternata .4 في درجة حرارة 28 في الحاضنة في اليوم الاول 4.50 ملم A. destruens bills 6.33 ملم اما الفطر .م 40 (4. 5 ملم ، اما في اليوم الثاني للنمو الفطري فقد بلغ معدل النمو القطري للفطر .لم 10.5 0 ممم وللفطر A. destruens 15.73 ملم وللفطر A. tenuissima بلغ 10.56 ملم ءاما معدل النمو في اليوم الثالث فقد بلغ A.alternata_paall 20.5 ملم A. destruens hills بلغ 20.4 ملم وللفطر A. tenuissima بلغ 20.4 ملم . بينت نتائج التجارب المختبرية لتقييم كفاءة مستخلص نبات الطرفة في تثبيط الفطر A, 0 في اطباق بتري بعد سبعة ايام من النمو ان اضافة مستخلص نبات الطرفة الكحولي بتركيز 5 الى PDA مع البكتريا subtilis .8 اعطى نسبة عالية للتثبيط مقارنة بالفطرالنامي بدون اي اضافة اذ بلغ معدل النسبة المئوية للتثبيط 9079.63 في حين بلغ 9,081.85 للفطر A. destruens وللفطر A. tenuissima %82.59 . اظهرت التجارب المختبرية للكشف عن al gall الفعالة في مستخلص الطرفة الكحولي والمائي ان وجود الفينولات المتعددة في مستخلص الطرفة الكحولي اكثر من كميته في مستخلص الطرفة المائي. بينت الدراسة ان المرض انحسر بشكل كبير بعد معاملة الشتلات بالمستخلص الكحولي للطرفة مع البكتريا ...8 ،كما بينت نتائج التجارب الحقلية ان جميع العوامل الاحيائية المستخدمة في الدراسة ادت الى ظهور نتائئج ايجابية لمعايير النمو المدروسة لشتلات اللالنكي بعمر سنتين كالمساحة الورقية وعدد الافرع الحديثة والمحتوى الكلوروفيلي وشدة الاصابة. اظهرت نتائج التجارب الحقلية مقاومة شديدة للمرض من قبل شتلات البرتقال ولهذا تم عمل فحص High Performance Liquid Chromatograph لمعرفة Li gS ت اوراق البرتقال من المركبات الفينولية حيث تم فحص 20 عينة من اوراق البرتقال وتبين وجود المركبات الفينولية اذ بلغت نسبة Galic acid في ثلاث عينات فقط 0.38 و2.58 و0.24 ملغم لكل غم في حين تراوحت نسب Naringine بين 0.29- 1.645 ملغم لكل غم ، كما بلغت نسب Freulic acid بين 0.8- 10.635 ملغم لكل غم وبلغت نسب Luteolin بين 4.082-0.375 ملغم لكل غم كما بلغت نسبة Rutin بين 2.765-0.23 ملغم لكل غم .

e study aimed to use the extract of Tarfa plant in the control of B. subtilis and citrus bacteria. The study also included the isolation and identification of the fungus that causes death from citrus in three governorates, namely, Babylon, Karbala and Najaf, known for the cultivation of citrus fruits (orange, lemon, linden and bitter orange). ) For the period from April 2019 to April 2021, the results showed that all the orchards surveyed were infected with retrograde death disease, with rates ranging between 65-32%. The results of isolation and diagnosis showed for one hundred samples of twigs Leaves, stems and fruits of citrus trees have several Fungal genera, Alternaria spp. Aspergillus and , Geotrichum , Penicillium , Fusarium Colletotrichum with a presence rate that ranged between 1.61 and 69.35% in the tested samples, as the percentage of presence of the fungus was 69.35 % Alternaria, and thus Alternaria spp. was the most common fungus for all tested samples. The results of the molecular diagnosis of the fungus showed that the fungus The causative agent of the disease is Alternaria, and by using the technique of electrophoresis of the PCR products, it was found that there are three types of bundles closely related to species A, A tenuissima, A. destruens, A. alternata. The test revealed that all isolates were pathogenic, but there was a difference in the severity of their infection with the fruits of the four species (orange, lemon, bitter orange, and orange), where the experiment was carried out in two ways: spraying the fungus on healthy fruits and injecting the fungus and the species The results of the pathogenicity in vitro of Alternaria isolates led to infecting fruits to varying degrees. The three fungi: A. alternata, A. destruens, and A. tenuissima. The results showed that spraying the fungus on healthy orange fruits led to the appearance of spots at a rate of different diameters among the fungal species, as it reached 4.67 mm for A. alternata, while the fungus injections For the same species, it reached 2.33 cm. As for the Rallanki, it was The diameters of the spots when spraying the fungal suspension of the fungus reached 10.83 alternata cm, while for the syringes, they reached 9.7 cm, as well as for lemon fruits, the diameters of the spots for the spray were 15.6 mm, and for the injections 2, as for the citrus fruits, they reached 10 mm for spraying and 6.3 cm for injections. B The results of the percentage infestation test using two-year-old citrus seedlings in pots under conditions similar to those in the woody canopy showed a significant difference for the comparison treatment and also for the fungus species. Oranges 25% and 100% on the bitter orange, lemon and orange for each of them, and lower rates of infection with the fungus A. tenuissima. The results of the field experiment to assess the percentage of infection severity on two-year-old citrus seedlings under conditions similar to those of the wooden canopy revealed that the bitter orange was the most affected by the infection, as the percentage reached The severity of infection with the fungus A. alternata was 60% and 75% for A. destruens and 64% for A. tenuissima. The incubator in the results of the experiment showed the effect of different temperatures on the national growth of the fungus A. alternaria of its three types for the first three days of growth, where the fungal growth rate of A. alternata at a temperature of 28 C° on the first day was 7.83 mm, for 7.67 A. destruens mm, and 6.63 A. tenuissima mm, and on the second day of the fungus growth, the diagonal growth rate of the fungus reached 10.5 A. alternata mm, and the fungus A. destruens 18.6 mm and the fungus A. tenuissima reached 10.8 mm, while the growth rate of the fungus reached 20.5 mm and the fungus A. alternata. A. destruens reached 20.4 mm and A. tenuissima reached 20.4 mm on the third day mm. The results of laboratory experiments evaluating the efficacy of A. alternata Tamarix aphylla L. extract in inhibiting the fungus of Petri dishes after seven days of growth showed that adding an extract with PDA alcoholic Tamarix aphylla L. plant at a concentration of 15% gave a high rate of inhibition compared to the developing fungus B. subtilis without any addition. The percentage of inhibition of A. destruens was 79.63%, while it reached 81.85% for the fungus. Experiments showed 82.59% for A. tenuissima and for the laboratory fungus to detect the active substances in the alcoholic and aqueous Tamarix aphylla L. extract that the presence of multiple phenols in the alcoholic Tamarix aphylla L. extract was more than its amount in the aqueous Tamarix aphylla L. extract. The study showed that the disease receded significantly after treating B.s. seedlings with alcoholic extract of Tamarix aphylla L. with bacteria. The results of field experiments also showed that all the biological factors used in the study led to the emergence of positive results for the growth criteria studied for two-year-old seedlings, such as leaf area, new branches and content of Chlorophyll and severity of infection The results of field experiments showed a strong resistance to the disease by orange seedlings, and for this reason, a High Performance Liquid Chromatograph was conducted to find out the components of orange leaves from phenolic compounds, as 20 samples of orange leaves were examined and it was found that phenolic compounds were present, as the ratio of Galic acid in three samples was only 0.38 and 2. 58 and 0.24 mg per g, while Naringine ratios ranged between 0.29 1.645 mg per g, Freulic acid ratios ranged between 0.8 - 10.635 mg per g, Luteolin ratios ranged between 4.082 - 0.375 mg per g, and Rutin ratios ranged between 2.765 - 0.23 mg for each gram.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب