تأثير التواقت الضوئي وبعض المؤثرات الخارجية في الساعة البايولوجية للفطر Neurospora crassa كنموذج لدراسة تأثيرها على الإنسان

الباحث

نور ميسر صادق امين السردار

المشرف

محمد ابراهيم خليل الطائي

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية التربية للعلوم الصرفة / قسم علوم الحياة

الشهادة

دكتوراه

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

الساعة البيولوجية ; Neurospora crassa ; التواقت الضوئي ; التعبير الجيني

تم دراسة تأثير الضوءٍ و الظلام وبعض المؤثرات على الساعة البيولوجية للفطر Neurospora crassa الذي تم استخدامه كنموذج قياسي في جميع التجارب قيد الدراسة sally تم الحصول عليه من المركز الوراثي للفطريات Fungal Genetics Stock Center من الولايات المتحدة الامريكية إذ يعد كائنا نموذجيا يستعمل في دراسة الساعة البيولوجية عن طريق تنميته على وسط Vogel’s بدرجة حرارة ثابتة ودورات ضوء مختلفة ( ضوء مستمر idl gill, الضوئي2 1ساعة ضوء/2 [ساعة ظلام، ظلام مستمر ) مع عدة تراكيز مختلفة من بعض المؤثرات( الميلاتونين و الدويامين و القهوة و نترات الرصاص الثنائي و كبريتات الزنك و كلوريد الكادميوم و كلوريد الحديد الثنائي ) كما تم استخدام انابيب سرعة النمو لدراسة تاثير الضوء والظلام بوجود بعض المؤثرات على الساعة البيولوجية للفطر -N. crassa واجرى الكشف عن اضطرابات الساعة البيولوجية للفطر 7١ crassa باستخدام تقنية ELISA) Enzyme liked Immunosorbent Assay ) إذ تم قياس هرمون الميلاتونين ويروتين 2 . اضافة الى قياس التعبير الجيني لجينات الساعة البيولوجية للفطر WC-1 و RAS sCcg-16 باستخدام تقنية -Real time PCR technology اظهرت النتائج الى انتظام وكثافة النمو عند دورة التواقت الضوئي مقارنة مع الاضاءة ضوء مستمرو ظلام مستمر. كما لوحظ اعلى نمو عند المعاملة بالدويامين مقارنة بانخفاضه عند المعاملة بالرمصاص . وكما بينت النتائج ارتفاع هرمون الميلاتونين عند الظلام المستمر مقارنة مع الضوء المستمر و التواقت الضوئي ولجميع المؤثرات في حين كان تركيز بروتين WC-2 مرتفعا عند التواقت الضوئي مقارنة مع الضوءٍ المستمر والظلام المستمر ولجميع المؤثرات ايضا. لقد اشارت نتائج التعبير الجيني الى ارتفاع التعبير الجيني لكل من جينين الفطر . 70-1 08-6 , عند التواقت الضوئي مقارنة مع الضوء المستمر والظلام المستمر في حين كان التعبير الجيني للجين 2485 اعلى عند الضوءٍ المستمر مقارنة بالظلام المستمر والتواقت ضوئي ولجميع المؤثرات كما تضمنت الدراسة التحري والكشف عن جين الساعة البيولوجية الساعة0/ 311171 في عينات pall المصابين بحالات من الارق والقلق باستخدام تقنية RFLP - PCR مع البادى alll بالجين Clock gene و الانزيم القاطع 85012861 وقياس هرمون الميلاتونين وبروتين الساعة باستخدام تقنية ELISA اضافة لقياس lipid profile اذ تم انتخاب 50 شخصا( 40 شخصا مصاباً بالارق و 10 اشخاص اصحاء كعامل سيطرة) . \ حيث اظهرت النتائج ADE انواع من الطراز الوراثية طراز وراشي طبيعي متماثل (TT) وطراز وراثي طافر (CC) وطراز غير متمائل ATC) كما iy النتائج انخفاض هرمون الميلاتونين ويروتين الساعة عند الطراز الوراثي (TC, CC) كما تم استخدام تقنية Sequencing للكشف عن مدى التشابه والاختلاف في تسلسلات القواعد النتروجينية إذ تم تسجيل خمس طفرات في بنك الجينات العالمي National Center For Biotechnology Information اضافة الى تحليل نتائج البلمرة المتعددة باستخدام برنامج 6 لتتقدير الاختلافات بين عينات الدم للاشخاص المصابين بالارق والاشخاص الطبيعيين.

A The effect of light, dark and some influences in the biological ال داعة of the fungus Neurospora crassa was studied, which was used as astandard model in all experiments under study, the fungus isolate was obtained from the fungal Genetics Stock Center from the American United States. Where it is Considered a genetic model organism used in the study of the biological ال داعة by it is growing on a Vogels medium in with aconstant temperature and different light cycles ( continuous light, 12 hours light /12 hours dark and continuous darkness ) with several different concentrations of stimuli used in the study ( melatonin, dopamine, Coffee, lead nitrate, Zinc sulfate, Cadmium chloride, iron cloride ) The growth trace tubes were also used to study the effect of light and dark in the presence of some influences in the biological ال داعة of N. crassa. The detection of circadian disorders of the fungus N. crassa was conducted using Enzyme liked Immunosorbent Assay ELISA technique. Where the melatonin hormone and WC - 2 protein were measuring in addition to measuring the gene expression of the genes WC - 1, Ccg – 16 and RAS of the circadian ال داعة genes in the fungus using Real time PCR technology. The results showed the regularity and density of growth at the cycle of illumination of 12 hours of light / 12 hours of darkness compared to the illumination of 24 hours of light and 24 hours of darkness , the highest growth was observed when treated with dopamine compared to its decrease When treated with lead. The results also showed an increase in the hormone melatonin in continuous darkness compared to continuous light,and 12 hours of light / 12 hours of darkness for all effects while the concentration of WC- 2 protein was high at 12 hours of light / 12 hours of darkness compared B with continuous light and continuous darkness and for all influences as well. While as the results of gene expression for fungi genes indicated higher gene expression WC - 1 and Ccg - 16 at light 12 hours light / 12 hour's dark compared with continuous light and continuous darkness, while the RAS gene expression was higher at continuous light compared to continuous darkness / 12 hours light and 12 hours of darkness and for all the influences. The study also included the investigation and detection of the biological ال داعة gene 3111T / C in blood Samples of patients with insomnia using RFLP-PCR technique with the primer of ال داعة genes and the restriction enzyme Bsp 12861, the measurement of the hormone melatonin and the الداعة protein using the ELISA technique, in addition to measuring the lipid profile 50 people (40 patients with insomnia and10 healthy people were elected as control factor). Where the results showed three types of genotype Normal Homozygous ( TT ) Mutant Homozygous ( CC ) Hyterozygous ( TC ). The results also showed decreased in melatonin and ال داعة protein in the TC and CC genotypes compared to its increase in the TT genotype. The sequencing technique was also used to detect the extent of similarity and difference in the sequences of nitrogenous bases, where five mutations were recorded in the National center For Biotechnology Information global gene bank. In addition to analyzing the results of sequencing using the MEGAX program to estimate the differences between blood samples of people with insomnia and normal people. --- page 182 [OCR+] --- Studying the Effect of Some Environmental and Chemicals Factors in Some Metabolic Processes and Gene Expression in the Fungus Neurospora crassa as a Standard Model A Thesis Submitted By Noor Maysir Sadiq Amin Al Sardar To The Council of the College of Education for Pure Science University of Mosul In Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Ph.D. In Biology Supervised by Assist. Prof. Dr. Mohammad Ibrahim Khalil Al-Taie 2022 A.D 1444 A.H [OCR of page] Studying the Effect of Some Environmental and Chemicals Factors in Some Metabolic Processes and Gene Expression in the Fungus Neurospora crassa as a Standard Model A Thesis Submitted By Noor Maysir Sadiq Amin Al Sardar To The Council of the College of Education for Pure Science University of Mosul In Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Ph.D. In Biology Supervised by Assist. Prof. Dr. Mohammad Ibrahim Khalil Al-Taie 2022 A.D 1444 A.H --- page 183 [OCR+] --- University of Mosul College of Education for Pure Science The Effect of Light synchronization and Some External Stimuli on the Biological Clock of the Fungus Neurospora crassa as a Model to Study its Effect on Human Noor Maysir Sadiq Amin Al Sardar Ph.D. Thesis Biology Supervised by Assist. Prof. Dr. Mohammad Ibrahim Khalil Al-Taie 2022 A.D 1444 A.H [OCR of page] University of Mosul 2 College of Education SEES for Pure Science a The Effect of Light synchronization and Some External Stimuli on the Biological Clock of the Fungus Neurospora crassa as a Model to Study its Effect on Human Noor Maysir Sadiq Amin Al Sardar Ph.D. Thesis Biology Supervised by Assist. Prof. Dr. Mohammad Ibrahim Khalil Al-Taie 2022 A.D 1444 A.H

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب