استخدام بعض المعايير التصنيفية ودلائل التضاعف العشوائي لسلسلة الحامض النووي PCR-RAPD في تحديد التباين الوراثي بين أصناف من الفاصوليا Phaseolus L. (Fabaceae) المزروعة في حقول محافظة نينوى

الباحث

نور نبيل يحيى الطالب

المشرف

عامر محسن محمود - كمال بنيامين ايشو

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية التربية للعلوم الصرفة / قسم علوم الحياة

الشهادة

دكتوراه

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

الفاصوليا ; التصنيف النباتي ; PCR-RAPD ; التباين الوراثي

تضمن البحث الحالي استخدام المؤشرات التصنيفية المظهرية والتشريحية والكيميائية وحبوب اللقاح فضلاً عن مؤشرات التضاعف العشوائي لسلسلة الدنا PCR-RAPD لتحديد التباين الوراثي لبعض أصناف أنواع جنس الفاصوليا Phaseolus L. من العائلة البقولية Fabaceae المزروعة في حقول محافظة نينوى التي ots بالأصناف (‘Dellaregina’ ،“Brinco’ ،Gii- 867 ،‘Strick’ ،‘BRS. Executive’) للنوع Phaseolus vulgaris والأصناف ،Scraletrunner bean ،‘Tabasco’ ،Brs- pitanjo) (“Lima beans’ للنوع Phaseolus lanatus L. والأصناف ،‘Siscresiatainpaleta’) (‘Frasca’ ،‘Massorn’ التابعة للنوع .1 .Phaseolus coccineus شملت الدراسة المظهرية الصفات العامة للجذور وسيقانها وأوراقها والأزهار والأجزاء الثمرية والبذور فضلاً عن الكساء السطحي Indumentum لها وذلك باستخدام المجهر الضوئي Light microscope (LM) وأظهرت تغايرات في صفات الأوراق والثمار والبذور من حيث الشكل واللون والأبعاد كما ظهر اختلافات في الكساء السطحي والزخرفة السطحية للبذور surface ornamentation باستخدام المجهر الإلكتروني الماسح Scanning Electro Microscope (SEM) لسطح البذور وأمكن تقسيمها إلى خمس مجاميع وهي: الأولى كان شبكي منقر Foreate reticulate في الأصناف ،(‘Frasca’ s ‘Dellaregina’ s “Brinco’) والثانية ld شكل شبكي يحوي على حليمات صغيرة Reticulate papillae وتضم الأصناف ‘Tabasco’) و ‘Lima Lil ،(beans’ الثالشة حليمي Muricate وشملت الأصناف ‘BRS. — Executive’) ،(“Scarlet runner bean’ s Gii-867’ s ‘Strick’ 5 والرابعة ذات شكل منقر Pitted وتضم الأصناف ،(“Massorn’ s ‘Siscresiatain paleta’) بينما الخامسة: متعددة الاضلاع 80081 ينفرد بها الصنف .(‘Brs-Pitanjo’) وأظهرت دراسة حبوب اللقاح أنها من الطراز الثلاشي الفتحات والاخاديد Tricoplorate وأظهرت تغايرات في الزخرفة السطحية لحبوب اللقاح عند فحصها بالاعتماد على المجهر الإلكتروني Scanning electron (SEM) microscope )3 أمكن تقسيمها إلى أربع مجاميع وهي: الأولى: حليمي Muricate وتمثلت بالأصناف <‘Siscresiatain paleta’ ،‘Brs-Pitanjo’ ،Lima beams ،‘Strick’ still, ،“Massorn’ 4: مخطط Striate وتضم الأصناف ‘Gii- ،BRS. Executive’ Scarlet runner beam ،‘Tabasco’ ،867’ والثالثة: منقر Pitted وشملت الأصناف ‘Frasca’ ،‘Dellaregina’ ،‘Brinco’ وأظهرت نتائج الفحوصات التشريحية التي تمثلت بصفات البشرة للأوراق ونظام التعرق إضافة إلى المقطع المستعرض لنصل الوريقات وسوبقاتها \ وتبين من خلال الدراسة ظهور اختلافات واضحة في خلايا البشرة وتردد الثغور ودليلها الثغري وسمك وعدد طبقات النسيج العمادي والاسفنجي وشكل السويق وسمك الحزم الوعائية والنسيج الكلورنكيمي والكلونكيمي. وفي الدراسة الكيميائية تم تشخيص (5) مركبات فينولية اعتماداً للمركبات القياسية وهي: Caffic acid ،Qurcetine ،Keamferol ،Rutin ،Gallic acid إذ أظهرت الأصناف قيد الدراسة تغايرات في تركيز المحتوى الكيميائي لمستخلص أوراق أصناف انوع الجنس المدروسة وذلك باستخدام تقنية كروماتوكرافيا الطور السائل عالي الأداء HPLC وهي: المركبات Gallicacid و Rutins Keam_ferol_s Cafficacid وعطتاءه0101. في حين أظهرت الدراسة الطيفية عند فحص المستخلص الكحولي الكلوروفيلي بجهاز الأشعة فوق البنفسجية Ultraviolet light (uv) تغايرات واضحة ذات اهمية تصنيفية بين أصناف أنواع جس الفاصوليا L. 15 وذلك بالاعتماد على قيمة الامتصاصية max 7 الذي يمثل أعلى إمتصاصية. أما المؤشرات الوراثية فتضمنت تقدير التشابه والبعد Abell بين أصناف أنواع الجنس المدروسة باستخدام تقانة التضاعف العشوائي المتعدد الأشكال لسلسلة الدنا (RAPD) Random Amplification Polymorphic DNA إذ تم في مكائرة لقطع الحامض النووي 1014 وتضمينها من خلال تفاعل البلمرة المتسلسل Polymerase chain Reaction وذلك باستخدام (13) sal: عشوائي. ومن خلال شجرة التحليل العنقودي Dendrogram لأصناف أنواع جنس الفاصوليا Phaseolus L. أظهرت ثلاث مجاميع رئيسة وهي: المجموعة الرئيسة الأولى First main group شملت هذه المجموعة الأصناف ‘Gii-) ،‘Lima_ beans’ ،Siscresiatian paleta ،‘Dellaregina’ ،‘Strick’ ،867’ -815' (“Brinco’ ،Massaru ،‘Frasca’ ،Pitanjo’ وانقسمت هذه المجموعة إلى مجموعتين فرعية Subgroubs ضمت المجموعة الفرعية الأولى شملت الأصناف ( ‘Frasca’, Sis (cresiatain, ‘Brs-Pitanjo’, ‘Tabasco’, ‘Massorn’, ‘Lima beans’ وتراوح التشابه الوراثي ما بين )0.687- 0.883(، Ld المجموعة الفرعية الثانية تضم الأصناف ) ‘Brinco’, (‘Strick’, Dellaregin, ‘Gii-867’ وتراوح التشابه ما بين (0.873-0.766) وان انتماء هذه الأصناف إلى مجموعة واحدة يدل إلى وجود درجة تشابه أعلى ضمن المادة الوراثية التي يستند بدورها على عدد الحزم المشتركة الناتجة من المؤشرات المستخدم في تفاعلات ال RAPD وكان التشابه مدعوماً من قبل الدراسات المظهرية والتشريحية إضافة إلى الدراسة الكيميائية. المجموعة الرئيسة الثانية Second main group ضمت هذه المجموعة الصنف “BRS. Executive’ التابع للنوع Phaseolus vulgaris إذ لم يرتبط مع أصناف الأنواع ad الدراسة الا بعدد قليل من مواقع ال RAPD إذ اظهر تفرد في عدد من المواقع والأحجام الجزيئية. المجموعة الرئيسة الثالثة Third main group فقد ضمت الصنف ‘Scarlet runner bean’ للنوع Phasealus lanatus كونه لم يرتبط مع أصناف الأنواع الأخره ى قيد الدراسة الا بعدد قليل من مواقع RAPD واظهر بذلك تفرداً في عدد من المواقع وأحجامها الجزيئية. مما ales يبتعد عن الجميع إذ اتسم بنمط مميز يختلف بشكل واضح مع مجاميع الأصناف الأخرى المدروسة. a

A The current research included the use of indicators of taxonomic importance and indicators of random amplified polymorphic of DNA PCR-RAPD to determine the genetic distance of some cultivars species of the genus Phaseolus L. belong to the (Fabaceae) cultivated in Nineveh Governorate, which were represented by the cultivars (ʽBRS. Executiveʼ, ʽStrickʼ, Gii-867, ʽBrincoʼ, ʽDellareginaʼ) of the genus Phaseolus vulgaris and the cultivars (Brs- pitanjo, ʽTabascoʼ, Scraletrunner bean, ʽLima beansʼ) of the genus Phaseoluslanatus and the cultivars (ʽSiscresiatain paletaʼ, ʽMassornʼ, ʽFrascaʼ) of the Phaseolus coccinens. The morphological study included the general characteristics of the root, leaves, flowers, fruit parts and seeds, as well as the lndumentum surface covering using a Light microscope (LM). Scanning Electron Microscope (SEM) used for examinate the surface of seeds showed that can be divided into five groupes, namely: Group I: Foreate reticulate in cultivars (ʽBrincoʼ, ʽDellareginaʼ and ʽFrascaʼ), Group II: Reticulate shape containing small Reticulate papillae and includes cultivars (ʽLimaʼTabascoʼ and Tabascoʼ Group III: Papillary muricate and includes cultivars (ʽBRS. Executiveʼ, ʽStrickʼ, Gii-867ʼ and ʽScarlet runner beanʼ), Group IV: Pitted shaped and includes cultivars (ʽSiscresiatain paletaʼ and ʽMassornʼ), Group Fifth: Polygonal unique to the cultivar (ʽBrsjoʼBrs- Pitan ). As for the pollen grains, it appeared of the tricoplorate type, and it showed variations in the surface decoration of the pollen grains, when examined by using a scanning electron microscope (SEM) could be divided into four groups, namely: The first group: Papillary muricate and represented by the cultivars ʽ Strickʼ, Lima beams, ʽBrs -Pitanjoʼ, ʽSiscresiatain paletaʼ, ʽMassornʼ, Group II: Striate scheme and includes B ʽBRS cultivars. Executiveʼ, ʽGii-867ʼ, ʽTabascoʼ, Scarlet runner beam, Group III: Pitted beak. Cultivars include ʽBrincoʼ, ʽDellareginaʼ, ʽFrascaʼ. As for the anatomical study, the epidermal characteristics of the leaves and the venetation system were represented in addition to the transverse section of the blade and stalk. It was found through the study that clear differences appeared in the epidermal cells, the frequency of the stomata and its guide, the thickness and number of layers of the columnar and spongy tissue, the shape of the stalk, the thickness of the vascular bundles, the thickness of the chlorenchym tissue and the clonaki. As for the chemical study, (5) phenolic compounds were diagnosed according to the standard compounds (Gallic acid, Rutin, Keampferol, Qurcetine, Caffic acid), which showed variations in the concentration of the chemical content of the extract of the leaves of the genus Phaseolus L. using high liquid phase chromatography technique. Performance HPLC. While the spectroscopic study, upon examination with an ultraviolet light (uv) device, showed clear variations of taxonomic importance between the cultivars of the bean genus Phaseolus L. in the alcoholic extract of chlorophyll, depending on the values of λ max. The genetic study included estimating the genetic dimension among the cultivars of the genus Phaseolus L. using the Random Amplification Polymorphic DNA (RAPD) technology, where the DNA was multiplied and included through the polymerase chain reaction using (13). Through the dendrogram of the cultivars species of the genus Phaseolus L., it was found that they are divided into three main groups, namely: First main group This group included cultivars (ʽGii-867ʼ, ʽStrickʼ, ʽDellareginaʼ, Siscresiatian paleta, ʽLima beansʼ, ʽBrs-Pitanjoʼ, ʽFrascaʼ, Massaru, ʽBrincoʼ) This group was divided into two subgroups that included the first subgroup of taxa. (ʽFrascaʼ, Sis cresiatain, ʽBrs- Pitanjoʼ, ʽTabascoʼ, ʽMassornʼ, ʽLima beansʼ) and the genetic similarity ranged between (0.687- 0.883), and the second subgroup includes cultivars (ʽBrincoʼ, ʽStrrickʼ, Dellaregin). The similarity ranged between (0.766-0.873), and the belonging of these cultivars to one group indicates a higher degree of similarity within the genetic material, which in turn is based on the number of joint bundles resulting from the indicators used in RAPD interactions, and the similarity was supported by morphological and anatomical studies in addition to the chemical study. Second main group This group contained the class ʽBRS. Executiveʼ of the type Phaseolus vulgaris, where it was not associated with the cultivars of the studied species except with a few sites of the RAPD, where it showed uniqueness in a number of sites and molecular sizes. Except for a few RAPD sites, it showed uniqueness in a number of sites and their molecular sizes. Which made it stay away from everyone as it was characterized by a distinctive pattern that differs clearly with the groups of other types of school. --- page 231 [OCR+] --- University of Mosul College of Education for Pure Science Use of Taxonomic Characters and Random Amplification Polymorphic DNA to Determine the Genetic Dividation among varieties of Phaseouls L. (Fabaceae) Cultivated in Field of Nineveh-Governorate Noor Nabeel Yahaya Al-Talib Ph.D. thesis Biology Supervised by Assist. Prof. Dr. Amer Mohsen Mahmoud Assist. Prof. Dr. Kamal B. Esho 2022 A.D 1443 A.H [OCR of page] University of Mosul College of Education for Pure Science 2 طقف Use of Taxonomic Characters and Random Amplification Polymorphic DNA to Determine the Genetic Dividation among varieties of Phaseouls L. (Fabaceae) Cultivated in Field of Nineveh-Governorate Noor Nabeel Yahaya AI-Talib Ph.D. thesis Biology Supervised by Assist. Prof. Assist. Prof. Dr. Amer Mohsen Mahmoud Dr. Kamal B. Esho 2022 A.D 1443 A.H --- page 232 [OCR+] --- Use of Taxonomic Characters and Random Amplification Polymorphic DNA to Determine the Genetic Dividation among varieties of Phaseouls L. (Fabaceae) Cultivated in Field of Nineveh-Governorate A Thesis Submitted By Noor Nabeel Yahaya Al-Talib To The Council of the College of Education for Pure Science University of Mosul In Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Ph.D. In Biology Supervised by Assist. Prof. Dr. Amer Mohsen Mahmoud Assist. Prof. Dr. Kamal B. Esho 2022 A.D 1443 A.H [OCR of page] Use of Taxonomic Characters and Random Amplification Polymorphic DNA to Determine the Genetic Dividation among varieties of Phaseouls L. (Fabaceae) Cultivated in Field of Nineveh-Governorate A Thesis Submitted By Noor Nabeel Yahaya AI-Talib To The Council of the College of Education for Pure Science University of Mosul In Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Ph.D. In Biology Supervised by Assist. Prof. Assist. Prof. Dr. Amer Mohsen Mahmoud Dr. Kamal B. Esho 2022 A.D 1443 A.H

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب