دراسة تصنيفية وكيموحيوية مقارنة لنوعين من العلق الطبي المتوطن في العراق

الباحث

اسلام خالد كمال محمد الحكيم

المشرف

نجاح صبحي نايف العمر

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم علوم الحياة

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

Medicinal Leeches ; Taxonomy ; Biochemical Study ; Iraq

| ديدان العلق الطبي طفيليات معروفة منذ القدم والتي تم استعمالها ومازالت تستعمل كأداة علاجية في الطب والجراحة. هذه الدراسة تضمنت المقارنة بين نوعين من ديدان العلق الطبي التي تم جمعها من منطقتين مختلفتين في العراق ، العينات الأولى تم جمعها من قرية خورمال في محافظة السليمانية اما العينات الثانية فقد تم جمعها من قضاء شقلاوة في محافظة اربيل. شملت الدراسة جانبين الأول دراسة تصنيفية حيث تم تشخيص ديدان العلق بالأعتماد على صفاتها الخارجية (التصنيف المظهري) وللتأكد من هذا التشخيص تمت الأستعانة بعلم الأحياء الجزيئي حيث تم استخلاص الحامض النووي gall اوكسي (DNA) cisely من عينات المنطقتين وتم ارسالها الى المركز الوطني لمعلومات التقنية الحيوية وتم اكتشاف سلالة جديدة من Hirudo medicinalis من العينات الأولى (قرية خورمال) وتم تسميتها NI (الحرف الاول من اسم المشرفة والطالبة). المعزولة NI ل Hirudo medicinalis كانت الأكثر قرابة للمعزولة 2061 من Hirudo 15 والمعزولة 12067[ من Hirudo medicinalis . العينات الثانية للمنطقة الأخرى تم تشخيصها Hirudo verbana ،(سلالة (IN كانت الاكثر قرابة ل verbana 2717/00 (رقم الانضمام (KU672397.1 مع %100 تشابه تسلسلي 5 %100 تشابه مع بنك الجينات. المعزولات الاخرى الأكثر قرابة لمعزولة JIN 76750710 #717100 كانت Whitmania كذلك تم فحص العينات بواسطة التضخيم العشوائي لبلمرة الحامض النووي Gall اوكسي رايبوزني- تفاعل البوليميراز المتسلسل لدراسة الاختلاف الجيني بين عينات المنطقتين ولم تظهر النتائج اختلافات واضحة Lay كان السبب محدودية عدد النماذج. بعد ذلك تم عمل الشجرة الوراثية للنوعين التي اوضحت خطوط النسب التطوري لمختلف الأنواع. اما الجانب الثاني فكان دراسة كيموحيوية لنوعين من ديدان العلق الطبي وتضمنت دراسة لعاب ٠ Hirudo verbana_s Hirudo medicinalis as النتائج اظهرت ان كمية البروتين ASW في اللعاب ل H.medicinalis كان £16.66 1.15 مايكروغرام لكل سم مكعب وفي لعاب A.verbana كان 216.33 0.57 مايكروغرام لكل سم مكعب ، اما نتائج كمية البروتين الكلي في جسم lS H.medicinalis 31+ 1 مايكروغرام لكل سم مكعب وفي جسم 77.16770710/ كانت 237.33 1.52 مايكروغرام لكل سم مكعب. نتائج قياس الألبومين في لعاب ال H.medicinalis كانت 6.00 +0 مايكروغرام لكل سم مكعب وفي لعاب ال H.verbana كانت 6.00 +0 مايكروغرام لكل سم مكعب ٠، أما نتائج الألبومين في جسم ال H.medicinalis كانت 8.667 + 1.52 مايكروغرام لكل سم مكعب وفي جسم ال 00 كانت 10.334 + 0.57 مايكروغرام لكل سم مكعب. نتائج قياس الكوليسترول ،الدهون الثلاثية والدهن البروتيني عالي الكثافة في لعاب ال ٠ 5.77 2143.33 ¢ 5.77 2136.67 Gls H.medicinalis 251.1 8.50 مايكروغرام لكل سم مكعب على التوالي. Lil نتائج الجسم فكانت £415 25 6 £395 5 و 2202.25 1.25 مايكروغرام لكل سم مكعب على التوالي. نتائج اللعاب في Hverbana كانت £130 0 ، £140 0 و 51.1 3.56 مايكروغرام لكل سم مكعب على التوالي. Lil نتائج الجسم فكانت £673.33 72.34 ٠ 2530 0 و 2316.40 83.48 مايكروغرام لكل سم مكعب على التوالي. نتائج قياس انزيم اسيتايل كولين استريزكانت £10.19 5.43 ملي يونت لكل مل في لعاب ال 15 و £10.68 1.06 ملي يونت لكل مل في جسم ال 17.716010110115 ، بينما النتيجة كانت 5.28+ 2.65 ملي يونت لكل مل في لعاب ال H.verbana و 9.75+ 2.03 ملي يونت لكل مل في جسم ال H.verbana . أما نتائج قياس انزيم الكاريونيك انهايدريز كانت 21929.04 505.94 نانوغرام لكل لتر في لعاب ال H.medicinalis و £29.99 6.91 نانوغرام لكل لتر في جسم ال Hmedicinalis ، بينما النتيجة كانت 21529.58 258.42 نانوغرام لكل لترفي لعاب ال A.verbana و 220.01 10.003 نانوغرام لكل لتر في جسم ال H.verbana . تم قياس الكالسيوم ، miRNA، RNA ، 052114٠ ssDNA و نقاوة RNAd); DNAG) وذكرت النتائج في الفصل الرابع . هذه الدراسة اظهرت وجود تغيرات بسيطة في بعض المواد الكيموحيوية وفروقات واضحة في بعض المواد GAY! بين النوعين من العلق الطبي .

Medical leeches are well known parasites which have been used as therapeutic agents in medicine and surgery. The present study involved a comparison between two types of medical leeches, considering classic and molecular classification methods. Leeches samples which were collected from two different regions in Iraq, the first samples of leeches were collected from Khormal village- Sulaymania governorate, the second sample was collected from Shaqlawa town in Erbil governorate. The study included two parts, the first one was a taxonomic study where the samples of leeches were diagnosed depending on their external features (morphological taxonomy), Hirudo verbana having two characteristics features of broad diffuse pale orange paramedian stripes and an unicolored, greenish to yellow on a ventral surface with a pair of black ventro-lateral stripes, while the Hirudo medicinalis the dorsal side is dark brown to black bearing six longitudinal reddish or brown striped. To confirm this classification, molecular biology was used, DNA was extracted from the samples of the two regions and sent to National Center for Biotechnology Information (NCBI) and we discovered a new strain of Hirudo medicinalis in the first samples (Khormal village) which were given the name NI (which refers to first letter of the supervisor and the student's names). Hirudo medicinalis isolate NI was most closely related to Hirudo medicinalis isolate PO61 and Hirudo medicinalis isolate K067. The second sample of the other region was proved by NCBI to be Hirudo verbana isolate IN was most closely related to Hirudo verbana (Accession No. KU672397.1) with 100% sequence similarity and 100% query coverage. The other most related isolates to H.verbana isolate IN were Whitmania laevis. Random Amplified Polymorphic DNA- Polymerase chain reaction (RAPD-PCR) was also done to study the genetic differences between the samples of the two types and the results showed no clear differences, the reason may be due to limited number of samples. After that phylogenetic trees were done for the two types which showed the lines of evolutionary descent of different species. The second part of the study was a biochemical study of the two types of medical leeches which included the study of the saliva and the body of Hirudo medicinalis and Hirudo verbana. The results showed that the total protein concentration in saliva of H.medicinalis was 16.66 ± 1.15μg/cm3 and in saliva of H.verbana was 16.33 ± 0.57μg/cm3. The results of the total protein in the body tissues of H.medicinalis was 31 ± 1μg/cm3and in body tissues of H.verbana was 37.33 ± 1.52μg/cm3. The results of estimating the Albumin in saliva of H.medicinalis was 6.00±0 μg/ cm3and in saliva of H.verbana was 6.00 ±0 μg/ cm3. Concentration the Albumin in the body of H.medicinalis was 8.667 ± 1.52 μg/ cm3 and in the body of H.verbana was 10.334 ± 0.57 μg/ cm3. Concentration of cholesterol, triglycerides and HDL in the saliva of H.medicinalis were 136.67 ± 5.77, 143.33 ± 5.77 and 51.1 ± 8.50μg/cm3, respectively. The results in the body tissues were 415 ± 25, 395 ± 5 and 202.25 ± 1.25μg/cm3, respectively. The results in the saliva of H.verbana were 130 ± 0, 140 ± 0 and 51.1 ± 3.56μg/cm3, respectively. The results in the body were 673.33 ±72.34, 530 ± 0 and 316.40 ± 83.48μg/cm3, respectively. Estimating the AchE enzyme activity was 10.19 ± 5.43 mu/ml in the saliva of H.medicinalis and 10.68 ± 1.06 mu/ml in the body of H.medicinalis, while the result was 5.28 ± 2.65mu/ml in the saliva of H.verbana and 9.75 ± 2.03mu/ml in the body of H.verbana. Estimating the carbonic anhydrase enzyme activity was 1929.04 ± 505.94 ng/L in saliva of H.medicinalis and 29.99 ± 6.91 ng/L in the body of H.medicinalis, while the result was 1529.58 ± 258.42 ng/L in saliva of H.verbana and 20.01 ± 10.003 ng/L in the body of H.verbana. Estimating calcium, ssDNA, dsDNA, RNA, miRNA and the purity of DNA and RNA were done; the results are mentioned in chapter four. This study showed that there were only simple differences in some biochemical substances and notable differences in other substances between the two types of the medical leeches.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب