دراسة بعض عوامل الضراوة لأنواع من خمائر Candida spp. وأعفان Aspergillus spp. المعزولة من الأذن الخارجية والبصل وعلاقتها بنشاط المايتوكوندريا

الباحث

نبيل طه يونس حسن البدراني

المشرف

مها أكرم محمد علي الرجبو - محمد عبدالغفور أحمد يونس القطان

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم علوم الحياة

الشهادة

دكتوراه

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

خمائر الكانديدا ; أعفان الأسبرجلس ; عوامل الضراوة ; المايتوكوندريا

تضمنت الدراسة الحالية عزل وتشخيص الفطريات المسببة لالتهاب الأذن الخارجية الفطري وكذلك عزل وتشخيص الفطريات المسببة لتلف البصل ودراسة بعض عوامل EAC Otomycosis al أكانت عزلات مرضية eles الضراوة التي تعد في الغالب منتجات أيضية لمعظم الفطريات المعزولة بيئية، والكشف عن سم الاوكرا 4 في البصل ودراسة وظائف (جهد تأكسد) المايتوكوندريا للفطريات المعزولة سواءً أكانت عزلات مرضية أم بيئية في الظروف الطبيعية وعند معاملتها بالمضادين الفطريين (نستاتين وفلوكونازول) ومركب الثايمول. الخارجية الفطري GAY) تم الحصول على 43 عزلة من الفطريات المسببة لالتهاب من مرضى مصابين بالتهاب الأذن الخارجية الفطري بنسبة 9071.6 من المجموع EAC Otomycosis Candida spp. الكلي للمسحات الأذنية والبالغ عددها 60 مسحة أذنية، 25 عزلة منها تعود لجنس ال إصابات مشتركة للجنسين المذكورين، شخصت 75 Aspergillus spp. و11 عزلة تعود لجنس ال جميع الفطريات بالطرق التقليدية من خلال الفحوصات المظهرية على طبق بتري فضلاً عن دراسة Candida الصفات المجهرية، كما شخصت بالطرق الكيميائية الحيوية كاستعمال الوسط التفريقي Candida ةريمخ فكانت ، API-Candida system واختبار التشخيص chromogenic agar أنواع الفطريات ظهوراً في هذه الدراسة. ssi parapsilosis وتضمنت الدراسة جمع نماذج عشوائية من البصل بنوعيه (الأحمر والأبيض) من أماكن مختلفة شملت أسواقاً ومحلاتٍ عديدة في مدينة الموصل وتم عزل وتشخيص أنواع مختلفة من الفطريات المسببة وفطر Penicillium spp. وفطر Aspergillus شملت فطر .مم5 cA ne gs لتلف البصل وأظهرت النتائج وجود تراكيز ، ELISA بتقنية ال A كما تم الكشف عن سم الاوكرا ،Fusarium spp. - 0.06 للبصل الأحمر وطمم 6.68 ppb - 0.004 ppb تراوحت مابين A مختلفة من سم الاوكرا للبصل الأبيض. 5.21 ppb أن جميع عزلات Candida spp. أظهرت نتائج اختبار عوامل الضراوة لعزلات المبيضات أما قدرتها على إنتاج الغشاء الحيوي بطريقة الطبق فقد ظهرت ٠، كونت أنبوب الإنبات 5 عزلة من أصل 24 عزلة كونت الغشاء الحيوي وينسبة %84 تراوحت ما بين الضعيفة والقوبة 1 الإنتاجية للغشاء الحيوي. أما نتائج اختبار إنتاج الإفرازات الخارجية والتي تتمثل بأنزيم الفوسفولايبيز والعامل المحلل للدم 25 (الهيمولايسين) وأنزيم الإستريز فقد أظهرت وجود 9 عزلات منتجة لأنزيم الفوسفولايبيز من أصل عزلة وبنسبة 036؟9, و12 عزلة منتجة للهيمولايسين بنسبة 948: و6 عزلات منتجة لأنزيم الإستريز المعزولة من Aspergillus niger بنسبة 9024: أما نتائج اختبار إنتاج الأنزيمات الخارجية لعزلات قناة الأذن الخارجية EAC ومن البصل فقد أشارات النتائج إلى ظهور 6 عزلات من فطر Aspergillus niger منتجة للهيمولايسين، و3 عزلات منتجة لأنزيم الإستريز من مجموع 11 عزلة من عينات قناة الأذن الخارجية EAC كما أظهرت النتائج وجود 5 عزلات موجبة للهيمولايسين من أصل 20عزلة من فطر Aspergillus niger معزولة من البصل. وأظهر المضاد الفطري النستاتين نشاطاً تثبيطياً ضد الخمائر والفطريات المعزولة من قناة الأذن الخارجية EAC أعلى من المضاد الفطري الفلوكونازول ومركب الثايمول عند التركيز LOOH/ml وأظهر مركب الثايمول فعالية تثبيطية عالية ضد الفطريات الخيطية المعزولة عند نفس التركيز، ولم تظهر أي عزلة مقاومة لمركب الثايمول للخمائر والفطريات المعزولة، إذ كانت جميعها حساسة، مع ظهور عزلات مقاومة لكل من النستاتين والفلوكونازول. بينت نتائج دراسة نشاط المايتوكوندريا تبايناً في فاعلية الخمائر والفطريات المعزولة باستعمال صبغة MitoTracker probes إذ ظهر اللون الأحمر وتدرجاته الذي يشير إلى جهد التأكسد المتميز في المايتوكوندريا للعينات غير المعاملة بمضادات فطرية ومركب الثايمولء Lal اللون الأخضر فقد ظهر بعدد قليل من العزلات الفطرية والذي يشير إلى انعدام جهد التأكسد للمايتوكوندرياء أما بقية الألوان والتدرجات اللونية والواقعة بين اللون الأحمر والأخضر والمتمثلة باللون الأصفر وتدرجاته والتي تشير إلى مستويات أقل نشاطأ للمايتوكوندريا فكانت الشائعة في الدراسة الحالية.

A In this study, we aimed to isolate and diagnose the fungal species that could infect humans and cause otomycosis or infect the plant as the species that infect the onion. Furthermore, the virulence factors, which are mostly considered secondary metabolites, were identified and characterized for some of the isolated fungi of both pathogenic and environmental species. We focused also on detection of Ochratoxin A (OTA) in the onion and studied the mitochondrial function of the isolated fungi, and the effect of the antifungal agents (nystatin and fluconazole) in addition commercial thymol on isolated fungi. Out of 60 human ear secretion specimens, 43 (71.6%) were positive for the Otomycosis causing-fungal species; of which 25 represent Candida spp., 11 Aspergillus spp., 7 were a mix of both species. The identification of the fungi species was carried out using classical well-known methods as macroscopic and microscopical observations. Other diagnostic media cultures and kits were used, such as chromogenic agar and the API-Candida system which showed that the Candida spp. Isolated in this study mainly were Candida parapsilosis. Random samples of local onion were collected from Mosul city – Iraq, and several fungal species were identified including Aspergillus spp. (41%), Penicillium spp. (34%), Aspergillus ochraceus (13%), and Fusarium spp. (10%). ELISA test was used to detect the Ochratoxin A and showed various results, 0.004ppb-6.68ppb for Red onion and 0.06ppb-5.21ppb for White onion. Results showed that all Candida spp. were able to produce the Germ tube as a virulence factor, whilst the biofilm formation on the plate was variable, out of 24 isolates, 21 isolates were shown to form weak and intense biofilm. Extracellular secretions were also detected, the results showed that out of 25, 9 (36%) isolates were positive for phospholipase production, 12 (48%) produced hemolysin, and esterase was found in 6 isolates (24%). Out of 11 external auditory canal (EAC) isolates of Aspergillus niger, hemolysin was B produced in 6 isolates, and 3 isolates were positive for esterase production. Though onion isolates (20) showed to produce hemolysin in 5 isolates of Aspergillus niger only. Whereas nystatin showed the highest inhibition activity against yeasts and the filamentous fungi species compared with fluconazole and thymol at 100 μg/ml, all the tested fungal species were sensitive to the commercial thymol but not for the nystatin and fluconazole, some were resistant. The mitochondrial activity was also tested using specific MitoTracker probes. The non-treated (with antifungal or thymol) fungal species showed red color staining that refers to the distinct mitochondrial activity. The observed green color was weak, indicating the absence of the mitochondrial activity of the cell under the study. Furthermore, the detected yellow color in this experiment suggests suboptimal mitochondrial activity, which has represented most of the tested fungal species in this study.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب