التوصيف الجزيئي لجين PKD1 وبعض المتغيرات الكيميائية الحياتية لدى مرضى الكلية متعددة الأكياس

الباحث

يمامة عباس زيدان مطر الجنابي

المشرف

اويس موفق حامد الحسني

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم علوم الحياة

الشهادة

ماجستير

السنة

2023

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

الكلية متعددة الأكياس ; جين PKD1 ; التوصيف الجزيئي ; المتغيرات الكيموحيوية

مرض الكلية متعدد الأكياس Polycystic Kidney Disease (PKD) مرض وراثي يصيب AS ويعد مرض PKD أحد أكثر أمراض الكلية الوراثية شيوعاً التي تصيب الملايين في جميع أنحاء العالم.و1:6[215 Flix أول من أستعمل مصطلح PKD في سنة 1888، وقد عرف مرض PKD من خلال الأكياس النامية بصورة متزايدة داخل الكلية؛يحدث مرض ADPKD(Autosomal Domuinant polycystic Kidney Disease) بسبب طفرات في جين 1 بنسبة 785 9h بسبب طفرات في جين PKD2 بنسبة M15 وتؤدي الطفرات في جين 1 أو جين PKD2 إلى ظهور أنماط ظاهرية مختلفة للمرض. و تهدف هذه الدربلسة إلى تحديد العلاقة بين التباين الوراثي للجين 216101 وحالات الاصابة بمرض الكلية المتعدد الأكياس السائد في مدينة دهوك. شملت الدراسة الحالية 91 شخصا تراوحت أعمارهم بين(55-20) سنة من المراجعين لمركز الكلية في محافظة دهوك في مدة زمنية بدأت من شهر حزيران إلى شهر أيلول من سنة 2022كوتم تقسيم العينات على مجموعتين بالاعتماد على النتائج الكيموحيوية، المجموعة الأولى شملت 20 عينة SS كمجموعة سيطرة والمجموعة الثانية شملت 71 مريضاً مصاباً بأمراض كلوبة، تم أخذ 5 مل من الدم الوريدي وقسمت عينة الدم إلى ثلاثة اقسام؛ ووضع القسم الأول في أنابيب مع :18101 مانع للتجلط لاستخراج الحمض النوويء والقسم الثاني وضع في انابيب ابندروف حاوية على مادة الترايزول من dal استخلاص ال RNA أما القسم الاخير وضع في أنابيب خالية من أي مضاد للتخثر لفصل ee دم وحدد التباين الوراثي للجين(6120) PKD1 بواسطة Tetra-ARMS-PCRAsa وحدد تتابع النيوكلوتيدات للقطع المضخمة بالاعتماد على تقنية ~ DNA Jy Sequencing مستوى التعبير الجيني للجين PKDI بالاعتماد على تقنية ال RT-PCR و قياس مثيلة ال DNA في بادئ الجين PKD-1 تم قياس المؤشرات الكيموحيوية المرتبطة بوظائف الكلية والكبد والايضية (Glucose - Triglycerides- Cholesterol- Albumin- Urea- Creatinine- Calcium- ALT(Alanine Aminotransferase)-AST(Aspartate Aminotransferase) -total bilirubin). Lady لنتائج الدراسة تبين وجود تباين في نسبة المشاهدة الأليلية، وكذلك تكرار الأتماط الوراثية المختلفة للجين 121(1ءإذ أظهرت النتائج لمرضى ADPKD إِنّ قيمة تكرار Abell Lal الطبيعي السليم GG (wild genotype) كانت بنسبة %42 وهي النسبة الأعلى مقارنة بالنمط الوراثي الطافر GAIKCC (mutant genotype) تكون نسبته %27. أما النمط Abel) المتغاير GC (Hetero genotype) فكانت نسبته ]%3. مقارنة مع مجموعة السيطرة اذ كانت النسبة المئوية للانماط الوراثية المختلفة %85 للنمط الوراثي الطبيعي و9910 للنمط الوراثي المتباين و 905 للنمط الوراثي الطافر. كما بينت نتائج اختبار تسلسل النيوكليتيدات لجين PKDI وجود اختلافات غير مسجلة في تسلسل عدد من النيوكليوتيدات؛ وكذلك سُجل نمط وراثي جديد للجين PKDI ضمن عينات الدراسة في المركز الوطني للمعلومات الوراثية 71081,،وخمصص له الرقم التعريفي و أظهرت نتائج الدراسة وجود انخفاض في مستوى التعبير الجيني GenBank: LC750300.1 مقارنة مع مستوى التعبير الجيني لدى عينات السيطرة. ADPKD للجين 216101 لدى مرضى اما بالنسبة لمجموعة المرضى فقد A ACT= 1.0 اذ كان معدل التعبير الجيني لمجموعة السيطرة DNA كما أظهرت نتائج الاختبار التابع لعملية مثيلة ال (A ACT = 0.38 كان معدل التعبير الجيني متواجدة في جميع عينات الممضى الذين اجري عليهم DNA methylated في بادئ الجين 212101 بان Leis الاختبار وبنسبة %90 مقارنة بمجموعة السيطرة التي انعدم فيها حدوث المثيلة لبادئ الجين المدروس في جميع العينات المرضى مع الاصحاء وبنسبة unmethylated بينت النتائج وجود الحزم التابعة لعملية ال أظهرت نتائج الدراسة ارتفاع في تركيز الكوليسترول و الكلوكوز والدهون الثلاثية LS ،% 100 .2>0.05 مقارنة بمجموعة السيطرة عند مستوى احتمالية ADPKD بمصل الدم لدى مرضى مقارنة بالأصحاء اذ كانت النسبة 270 mg/d] فكانت نس بة الكلوكوز لدى المرضى كانت مقارنة 393 mg/d] المرضى cal وكانت مستويات الدهون الثلاثية(11181376611065) .105 mg/dl المرضى كانت gal (Cholesterol) ds sual sl) ومستويات .95 mg/d] بالأصحاء اذ كانت النسبة يلحظ أي تغاير كبير في مستوى aly .125 mg/d] مقارنة بالأصحاء اذ كانت النسبة 248 1 حيث 4.39 mg/d] اذ كانت النسبة لدى المرضى ADPKD (4290 Gal الألبومين في مصل الدم تكون ضمن المعدل الطبيعي728/11 4.50. نستنج من هذه الدراسة ان التباين الوراثي المدروس التابع عينات (gal للجين 212101 يعتبر من المسببات الرئيسية للإصابة بمرض الكلية متعدد الأكياس السائد الدراسة.

A Polycystic Kidney Disease (PKD) is a genetic disease of the kidneys. PKD is one of the most common hereditary kidney diseases affecting millions worldwide. Flix Lejars was the first to use the term PKD in 1888, and PKD was identified as bilateral cysts growing inside the kidneys (ADPKD is caused by mutations in the PKD1 gene in 85% or due to mutations in the PKD2 gene in 15%. Mutations in the PKD1 gene or The PKD2 gene results in indistinguishable disease phenotypes; however, patients with PKD2 gene mutations often present with the disease later in life and have a better prognosis for the disease. Predominant polycystic kidneys in Dohuk city. The current study included 71 patients between the ages of (20-55) years, who visited the kidney center in Dohuk Governorate, in a period of time ranging from June to September of 2022. The samples are divided into two groups depending on the biochemical results. The first group included 20 samples that were considered as a group. A control and the second group included 71 patients with renal disease. 5 ml of venous blood was taken from the two groups above, the blood sample was separated into three parts, and the first part was placed in tubes with EDTA anticoagulant for DNA extraction, and a part was placed in Eppendorf tubes containing trisol from In order to extract the RNA and the last part, it was placed in tubes devoid of any anticoagulant to separate the blood serum. The genetic variation of the (G/C) PKD1 gene was determined by the Tetra-ARMS-PCR technique, and the nucleotide sequence of the amplified pieces was determined based on the DNA Sequencing technique and the expression level of the PKD1 gene was analyzed based on on technique The RT-PCR and the measurement of DNA methylation in the primer of the PKD-1 gene were measured. bilirubin). According to the results of the study, it was found that the allelic observation rate, as well as the recurrence of different genotypes of the PKD1 gene, as the results showed that for ADPKD patients, the recurrence value of the normal (wild B genotype) GG was 42%, which is the highest percentage compared to the CC (mutant genotype), which has a rate of 27%. %. As for the hetero-genotype, GC was 31%. Compared with the control group, the percentage of different genotypes was 85% for the normal genotype, 10% for the variant genotype, and 5% for the mutant genotype. The results of the sequencing test for the amplification of the PKD1 gene also showed the presence of unregistered differences in the sequence of a number of nucleotides, and a new genotype was recorded. The PKD1 gene was included in the study samples at the National Center for Genetic Information NCBI and was given the GenBank ID: LC750300.1. The results of the study showed a decrease in the level of gene expression of the PKD1 gene in ADPKD patients compared to the level of gene expression in control samples. Control Δ ΔCT = 3.2 As for the patient group, the gene expression rate was Δ ΔCT = 0.35, and the results of the test following the DNA methylation process in the primer of the PKD1 gene showed that methylated DNA was present in all samples of the patients who were tested by 90% compared to the control group In which there was no methylation of the studied gene initiator, while the results showed the presence of bundles belonging to the unmethylated process in all samples, patients with healthy ones, at a rate of 100%. ≤0.05. The glucose level in patients was 270 mg/dl compared to healthy subjects, when the ratio was 105 mg/dl. The levels of triglycerides (triglycerides) in patients were 393 mg/dl compared to healthy subjects, when the ratio was 95 mg/dl. dl). Cholesterol levels in patients were 248 mg/dl compared to healthy subjects, when the ratio was 125 mg/dl. No significant change was observed in the level of albumin in serum in patients with ADPKD, as the ratio in patients was 4.39 mg/dl. Where it is within the normal range (4.50 gm / dl). We conclude from this study that the studied genetic variation of the PKD1 gene is one of the main causes of polycystic kidney disease prevalent in the study samples.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب