استخلاص بعض المركبات الفعالة من الفطر المحاري Pleurotus ostreatus وتقييم فعاليتها الحيوية

الباحث

صفاء محمود سلطان احمد

المشرف

فاتن نوري عبد ملا عبد

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم علوم الحياة

الشهادة

دكتوراه

السنة

2023

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

Pleurotus ostreatus ; Oyster Mushroom ; Bioactive Compounds ; Antimicrobial Activity

تضمنت الدراسة الحالية عزل فطر Pleurotus spp. من مواقع مختلفة في مدينة الموصل من من الفترة 7 تشرين الثاني (نوفمبر) 2021 إلى 1 نيسان (أبريل) 2022. تم استخلاص الحمض النووي لاستخدامه للتشخيص الجزيئي للفطرالبازيدي -Pleurotus spp بواسطة تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) بناء على البادئات المتخصصة التي تنتمي إلى جين منطقة 5. أظهرت نتائج منتجات تفاعل البوليميريز المتسلسل بعد الترحيل الكهربائي أن جميع العزلات المختارة لها حزمة واحدة ب bp) 650). تم تحقيق التسلسل الجيني ل 115 للجين واستخدامه لتأكيد تشخيص .Pleurotus ostreatus تم تسجيل العزلات المشخصة في yall) كز الوطني لمعلومات التقنية الحيوية) (NCBI) نجحت هذه الدراسة في تحديد ثلاثة مركبات B-D-glucan و hexane tannin من المستخلص المائي و البتروليوم اير للأجسام المثمرة للفطريات بتقنية .HPLC أظهرت النتائج أن التراكيز المركبات hexane dichloromethane, tannin كانت أكثر من المستخلص المائي عند مقارنتها بالمستخلص العضوي ؛ وكانت تركيز B-D-glucan أعلى في استخلاص المذيب العضوي عند مقارنتها بالمستخلص المائي. تم استخراج هذه المركبات وتنقيتها باستخدام تقنيات HPLC و 5105-0386. قدر الوزن الجزيئي بحوالي (546.45 و 1701-8 و 84.93 كيلو دالتون) لكل من B-Dglucan و tannin و hexane le dichlormethane التوالي. تم تحديد الشكل البلوري الذري وثلاثي الأبعاد للمركبات ADA باستخدام تحليل برنامج ال -pymol تم الكشف عن التأثيرات المضادة للبكتيربا ( E. coli, Staphylococcus aureus, Bacillus (subtilis, and Proteus vulgaris والتأثيرات المضادة للفطريات ) Candida albicans, LS yall (Candida glabrata, Candida tropicales, and Candida lusitaniae النشطة الثلاثة بتركيزات مختلفة باستخدام تقنية الصفائح الدقيقة. وجدت النتائج أن B-D glucan له تأثير مثبط ضد الأنواع البكتيرية 5 Candida SPP بتركيز 200 ميكروغرام/مل. يزداد التأثير المثبط مع زيادة تركيز المركب. بشكل عامء كانت بكتيريا Proteus vulgaris أكثر أنواع البكتيريا حساسية من B- ببينما كانت EL coli, هي البكتيريا الأكثر مقاومة. كما أن C. lusitaniae كانت الأكثر حساسية من B-D glucan بين الأنواع الأخرى المستخدمة قيد الدراسة بينما أظهرت C. albicans مقاومة أعلى للمركب. وجدت النتائج أيضا أن التانين بتركيز 50 ميكروغرام/مل كان له تأثير مثبط عالي ضد vulgaris .2 بينما كانت E.coli أكثر مقاومة بنفس التركيز. علاوة على Ala كان C. 5 هو الأكثر تثبيطا ، في حين كان dal C. glabrata تأثرا ب متصمة1. بالنسبة hexane 100 هي الأكثر حساسية لها بتركيز Staphylococcus aureus كانت ، dichlormethane حساسية أكبر للمركب على C. albicans مقاومة للمركب. أظهرت E. coli ميكروغرام ، بينما أظهرت Tannin أظهرت مقاومة عالية ضد silly ، C. tropicales Se من الناحية الطبية الحيوية ¢ وجدت الدراسة الحالية أيضا أن B-D glucan النقي له تأثير مفيد, على الكولسترول في pall مقارنة glucan ،8-1 في دم الفثران المعاملة بالمركبين بعد 30 يوم من التجريع الفموي. في التطبيقات البيئية ، كان للكتلة الحيوية للفطر ostreatus .2 القدرة على تسييل الفحم منخفض الجودة وتحوبله إلى قطرات زيتية على سطح المستعمرة الفطرية.أيضا ¢ اكدت الدراسة أن فطر .2 115 لديه القدرة على معالجة وتحلل المركبات الهيدروكريونية المعقدة من النفط الخام ADE: تركيزات (1 و 2 و %4( بعد خمسة أيام من التحضين عند استخدامها في عملية المعالجة الحيوية. بالمقارنة مع مستعمرة الفطر التي يبلغ قطرها 45 ملم في عينة السيطرة ، كان قطر مستعمرة الفطر بتركيز 1, من النفط الخام 20,86 ملم ، و 10,65 ملم بتركيز %2 ، و 10,33 ملم بتركيز 74.

This study included isolation of the genus Pleurotus spp. from different sites in Mosul city from November 7, 2021 to January 12, 2022 with its identification at microscope and molecular level. DNA were extracted then used for the molecular identification of Pleurotus spp. by polymerase chain reaction (PCR) usd specialized primers belong to the internal transcribed spacer ITS gene. The results of PCR products after electrophoresis showed that all selected isolates have one band with (650 bp). ITS gene sequencing of the gene was achieved and used for the confirmation of the identification for Pleurotus ostreatus. The diagnosed isolates were registered in the (national center for biotechnology information) (NCBI). This study succeeded in identified three compounds β-D‒glucan, tannin and hexane dichloromethane from water and petroleum ether extract of fungus fruiting bodies by High-performance liquid chromatography (HPLC) technique. Results showed tannin and hexane dichlormethane concentrations were more than in the aqueous extract, D-glucan concentrations were significantly higher in the organic solvent extraction when compared to the aqueous extract. This compounds were extracted and purified used HPLC and sodium dodecyl sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-page) techniques. The molecular weight was estimated to be about (504.45, 1701.8 and 84.93 KDa) to each of β-D‒glucan, tannin, hexane dichloromethane respectively. The atomic and three-dimensional crystal shape of the three compounds were identified using pymol analysis. The effect of three combiomd β-D‒glucan, tannin and hexane dichloromethane on the ( E. coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, and Proteus vulgaris) and (Candida albicans, Candida Nakaseomyses, Candida tropicales, and Candida lusitaniae) whre achieved at different concentrationry using micro-plate and the result refere that β-D‒glucan has an inhibitory effect against the bacterial and fungal species at a concentration of 200 μg/ml. The inhibitory effect increases with the increase of the compound concentration. Generally, Staphylococcus aureus was the most affected types of bacteria by β- D‒glucan while E. coli was the most resistant bacteria. Also, C. albicans were the most affected by β-D‒glucan among the other species under study while C. lusitaniae showed higher resistance to the compound. The results also found that tannin at a concentration of 50 μg/ml had a high inhibitory effect against B. subtillis while P. vulgaris was more resistant at the same attention. Moreover, C. tropicales was the most inhibited, whereas E. coli was less affected by the tannin. For hexane dichlormethane C. albicans was the most sensitive to it at a concentration of 100 μg/ml, while Staphylococcus aureus showed resistance to the compound. C. albicans showed more sensitivity to the compound unlike C. lusitaniae, which demonstrated high resistance to the tannin. Biology, the present study also found that pure β-D‒glucan has a beneficial effect on the serum lipid profile than standard β-D‒glucan in the blood of rets treated wih them after 60 days from dosing. In the environmental applications, the biomass of P. ostreatus had the ability to liquefy low-quality coal and convert it into oil droplets on the surface of the fungal colony. Also, the result study discovered that the fungus Pleurotus ostreatus had the ability to process and degrade complex hydrocarbon compounds of crude oil at three concentrations (1, 2, and 4%) for a period of five days when used in the bioremediation process. In comparison to the control sample's 45.00 mm- diameter mushroom colony, the diameter of the mushroom colony at a concentration of 1% crude oil was 20.86 mm, 10.65 mm at a concentration of 2%, and 10.33 cm at a concentration of 4%.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب