عزل وتشخيص خميرة Rhodotorula mucilaginosa من الترب الملوثة بالمشتقات النفطية وتقييم كفاءتها في المعالجة الحيوية

الباحث

سارة إبراهيم احمد هايس

المشرف

بادية عبد الرزاق ملا عبيدة

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم علوم الحياة

الشهادة

ماجستير

السنة

2023

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

خميرة Rhodotorula ; الترب الملوثة ; المشتقات النفطية ; المعالجة الحيوية

تضمنت الدراسة الحالية جمع 20 عينة ترية من حقل نفط Gh حسن في محافظة كركوك ومحطة تعبئة 151 النفطية التابعة لمحافظة أربيل / العراق في الفترة بين تأريخ 15/ 6/ 2022 ولغاية 15/ 9/ 2 .تم الحصول على 142 عزلة من الفطريات الخيطية والخمائر. شخصت العزلات بالاعتماد على الاختبارات المظهرية والمزرعية والكيموحيوية. واظهرت النتائج عزل 80 عزلة من الفطريات الخيطية وتوزيعها على 3 أجناس مختلفة Penicillium-Aspergillus و Rhizoctonia عرفت الفطريات A, E.quadrilieata.:A.parasiticus ،A. nidulans <A. fumigatus <A. caespitosus ،niger وكان الفطر A. niger اكثر الفطريات تكرارا في موقعي العزل وصل عدد عزلاته في محطة تعبئة (11) 9 عزلات )%56.25( وعزلة 15 )23.43 %( في حقل باي حسن اما الفطر A. fumigatus فكان اقلها تكرارا )%6.25( في محطة تعبئة 1>1. وال.م0م5 Rhizoctonia اقل تكرارا في حقل باي حسن )%1.56( وتفاوتت بقية الفطريات في نسب ظهورها. كما Ye في الدراسة ععزل 62 عزلة محلية من الخمائر تعود الى 8 اجناس Pichia skazachstania ،Kloeckera 7070711 ،Geotrichum ،Saccharomyces -Candida ،Rhodotorula تم دراسة قابلية مقاومة العزلات 56 R. mucilaginosa و 53 1S. cervisiae 16 مضاد حيوي و8 ايونات Gales ثقيلة. أظهرت النتائج بان العزلات المدروسة جميعها كانت مقاومة ل cAp Cty 012:7 في حين أنها ابدت حساسية تجاه المضاد الحيوي Ax وكانت النتائج متفاوتة مع بقية المضادات. وأبدت الخمائرمقاومة مطلقة لايونات المعادن الثقيلة 71150 5 KyCryO7 ومتفاوتة بالنسبة لبقية المعادن الثقيلة. اظهرت نتائج عزل وترحيل محتوى الحمض النووي البلازميدي من الخمائر باستخدام تقنية الترحيل الكهريائي في هلام الاكاروز احتواء العزلة 56 R. mucilaginosa والعزلة 53 S. cervisiae على حمض النووي البلازميدي. تم نجاح تحييد محتوى الحمض النووي البلازميدي للعزلة R. mucilaginosa 6 ان المستعمرات المحيدة لم تحمل صفة تحلل المركبات الهيدروكاريونية وهذا يشير الى ان الجينات المسؤولة عن هذه الصفة واقعة على الحمض النووي البلازميدي وأظهرت المستعمرات المحيدة حساسية تجاه المضادات الحيوية والمعادن الثقيلة المدروسة وبنسب مئوبة 9592-1 عدا ب150/لو0001. كذلك Gin نتائج تحييد العزلة 53 cervisiae .5 فقدان المقاومة للمضادات الحيوية ويمدى 7093-3. نجحت عملية الاقتران ما بين العزلة الواهبة 56 R. mucilaginosa وعزلة 53 S. cervisiae المحيدة كمستقبل saying اقتران 2.1 x 10% وأثبتت هذه الدراسة أن الحمض النووي البلازميدي المنتقل من العزلة 56 R. mucilaginosa يحمل lis المقاومة للمضاد الحيوي easy Er الجينات المسؤولة عن تحلل المركبات الهيدروكاريونية وهذا يؤكد بأن المورثشات المشفرة لصفة تحلل المركبات الهيدروكاريونية تقع على الحمض النووي البلازميدي. لتقليل أو إيقاف التهديدات التي تتعرض لها الأنظمة البيئية استغلت العزلة المحلية للخميرة الغير المحيدة والمحيدة في تحليل المركبات الهيدروكاربونية (النفط الخام 7. mucilaginosa 6 Bushnel بنوعيه الثقيل والخفيف فضلا عن وقود الحيوي اظهرت نتائج استعمال وسط الاملاح المعدنية المجهز بالمركبات الهيدروكاربونية وبنسبة %15 قدرة عالية للخميرة على تحلل Haas Medium المركبات الهيدروكاريونية واستحلابها في زمن قياسي يصل من 10- 20 يوم للنفط الخام بنوعيه و7/- Ajj) ايام بالنسبة للوقود الحيوي الديزل) في حين لم تتتمكن 0 المحيدة من تحليل اي من المركبات الهيدروكاربونية، ولوحظ حدوث تغييرات R. mucilaginosa 6 مظهرية في طبقة النفط الخام بنوعيه الثقيل والخفيف والديزل، ابتداء باليوم الخامس من التحضين بدلالة تغير لون الوسط بالكامل الى اللون البنى الغامق للنفط والعسلى للديزل وهذا يشير الى بدء حدوث عملية الاستحلاب، ومع استمرار التحضين الى 15 يوما لوحظ ظهور حلقة مع فقاعات خفيفة طافية على سطح الوسط الغذائي. كما بينت مخرجات التحلل باستخدام جهاز كروماتوكرافيا الغاز - مطياف الكتلة أهم المركبات الكيمياوية الناتجة من Gas chromatography—mass spectrometry (GC-MS) تحلل النفط الخام. إذ تبين ان عينة النفط الخام الثقيل المعاملة بمعلق الخميرة مكونة من 34 مركب كيميائي وعينة النفط الخام الخفيف المعاملة بمعلق الخميرة مكونة من 19 مركبء اما بالنسبة للوقود وظهرت المركبات عند أوقات احتباس مختلفة. Spo 47 الحيوي فقد بينت نتائج احتواء عينة المعاملة ان اختفاء بعض المركبات وظهور مركبات ايض ثانوية مختلفة في عينات المعاملة يعود الى قابلية للطاقة. ig IS الخميرة على تحليلها الى مركبات ثانوبة بسيطة بإمكانها الاستفادة منها كمصدر ثبت المحتوبيات ا 5559020985 محك ا1 1 ال اك nce sect ss ا Os اسسسية مح سسسك:5515 552525255 م 580 اطلافضي ستمض صريع 0 as | ie ل ل سوقت سوه س لهف 0 او 0] ١ والكلوكوز والاكار , 2 Medium 22 | قابلية النمو في المستويات المنخفضة من الماء مع الارتفاع في مستوى 6-2-6-3 el eee ae 22 | قابلية النمو في المستويات المنخفضة من الماء مع زيادة مستوى كلوريد 7-2-6-3 el ne ie

A The current study included the collection of 20 soil samples from the Bay Hassan oil field in Kirkuk governorate and the K1 oil filling station in Erbil / Iraq during the period between 6/15/2022 and 9/15/2022. A total of 142 isolates were obtained from filamentous fungi and yeasts. Isolates were diagnosed based on phenotypic, culture and biochemical tests.. The results showed the isolation of 80 isolation of fossil fungi and distributed to 3 different races Aspergillus, Penicillium and Rhizockonia The fungi A. NIGER, A. Caespitosus, A. Fumigatus, A. Nidulans, A.parasiticus, Emericella Quadrilieta A. The fungus A. Niger was more more and the fungus A. Niger was more more more. The fungi are repeated in the insulation sites. The Rhizoctonia SPP. is less frequent in the Bay Hassan field (1.56%) and the rest of the fungi varied in their appearance rates. Also 62 local yeast isolates belonging to different genera were isolated in the study Pichia, Saccharomyces, Geotrichum, Zygosaccharomyces, Kloeckera, Kazachstania, Rhodotorula, Candida. Two Escherichia coli from the Bank of Life Sciences/ College of Science/ University of Mosul/ Iraq were also obtained. The diagnosis was confirmed using Eosin Methylene Blue (EMB) and API 20 E. The ability to resist isolation has been studied R. mucilaginosa S6 and S. Cervisiae S3 for 16 antibiotic and 8 heavy metal ions. The results showed that all the studied insulation were resistant to AP, FC, CLIN and CT while they were allergic to AX antibiotics and the results were varying with the rest of the antibiotics. The yeasts expressed an absolute resistance to heavy metal ions NiSO4 and K2Cr2O7 and varying for the rest of the heavy metals. The ability of the E. coli bacteria to resist antibiotics and heavy metal ions has been studied. The results showed that two tested E. coli bacterial isolation was resistant (AP, CF, CLIN, CT, ER, FC, STR, RIF, NYS, Pen, AX, ITR, TC and COT) While the isolated (2) isolated from the water is sensitive to the antibiotic Van, the B isolation E. Coli Urine (1) isolated from the estate was sensitive to the antibiotic. Sensitive for CdCl2 and CoCl2. The results of the insulation and deportation of the plasmidic DNA content of yeasts and bacteria using the electrical deportation technology in the Acarose gel contained isolation R. mucilaginosa S6, S. cervisiae S3 and E. coli (1) on the plasma DNA. The neutralization of the plasma DNA content was successful for isolation R. mucilaginosa S6 The neutral colonies showed an allergy to antibiotics and heavy minerals studied at 1-92%, except NiSo4 and CoCl2. Also showed the results of neutralization of isolation S. cervisiae S3 Loss of antibiotics resistance by 3-93%. The results of neutralization of isolation showed E. coli (1) Loss of antibiotics resistance and a range of 7-97% except AX, this is confirmed by gelatinous electrical deportation. The process of conjugation between the Wahba isolation succeeded R. mucilaginosa S6 and the S. cervisiae S3 isolation as a future and a frequency of 2.1 x 10-8. This study demonstrated that the plasmidic DNA transmitted from isolation R. mucilaginosa S6 carries the genes of the antibiotic resistance and carries the genes responsible for the decomposition of hydrocarbon compounds, in addition to an attempt to associate with the kingdoms between the yeast R. mucilaginosa S6, E. coli(1) bacteria (1) As a future. The results showed that the Plasidic DNA bearing the resistance genes of RIF has the ability to move and move from yeast to bacteria and with a frequency of 5.8 x 10-8. The results also showed that the neutral bacteria have the ability to receive and localize the plasmid from the yeast through the process of conjugation, and the colonies resulting from the conjugation expressed the characteristic of the decomposition of hydrocarbon vehicles, and this confirms that the encoded genes of the recipe for decomposition of hydrocarbon vehicles are located on the plasma DNA. To reduce or stop the threats to the ecosystems, the local isolation of the lying and unusual and associated and bacteria associated with the analysis of hydrocarbon vehicles (crude oil in its heavy and light quality as well as diesel fuel). The results of the use of Bushnel Haas Medium, equipped with hydrocarbon vehicles, showed 15% high yeast capacity to decompose hydrocarbon vehicles and their embrace in a record time of 10-20 days for crude oil in two types and 7-10 days for biofuels (diesel) While the isolation R. mucilaginosa S6 was unable to analyze any of the hydrocarbon vehicles, and appearance changes in the crude oil layer were observed in its heavy, light and diesel quality, starting with the fifth day of incubation, in terms of the full change of the medium color to the dark brown color of the oil and honey of the diesel and this indicates this The initiation of the process of conjunction begins, and with the continuing incubation to 15 days, a loop is observed with light floating bubbles on the surface of the nutritional medium. The outputs of the decomposition using the gas chromatography (GAS Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS is the most important chemical compounds resulting from crude oil decomposition. It was found that the heavy crude oil sample treated with a yeast suspension consisting of 34 chemical compounds and mild treated oil sample treated. With a yeast suspended, it consists of 19 compounds, As for biofuels, the results of the transaction sample contained 47 compounds, and vehicles appeared at different retention times. The disappearance of some vehicles and the emergence of different secondary compounds in the treatment samples is due to the ability of yeast to analyze them to simple secondary compounds that can benefit from them as a carbon source of energy.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب