دور جينات rol لبكتريا Agrobacterium في تحفيز البناء الحيوي لمركبي الأبجينين والكامازولين في أنسجة نبات البابونج Matricaria chamomilla L.
Role of the rol Genes of Agrobacterium in Stimulating Biosynthesis of the Apigenin and Chamazulene Compounds in Matricaria chamomilla L. Plant Tissues
- الباحث
- آلاء معاذ إبراهيم يونس العبيدي
- المشرف
- أمجد عبد الهادي محمد
- الجامعة
- جامعة الموصل
- الكلية / القسم
- كلية العلوم / قسم علوم الحياة
- الشهادة
- ماجستير
- السنة
- 2024
- لغة الرسالة
- عربي
- الكلمات المفتاحية
- جينات rol ; البابونج ; البناء الحيوي ; الزراعة النسيجية
الملخص
تمثلت الدراسة الحالية في إنتاج نبيتات البابونج Matricaria chamomilla L. بتقانة الزراعة النسيجية، واخضاعه للتحول الوراثي ببلازميدات (pRi) root inducing plasmid المعزول من الناقل البكتيري Agrobacterium rhizogenes ATCC15834 بوساطة الحقن المباشر. وكذلك قياس تركيز OSs الأبجينين Apigenin والكامازولين chamazulene في أنسجته المُختلفة. سجّلت بذور نبات البابونج Matricaria chamomilla L. نسبة إنبات 9090 بعد عشرة all مُنتجة بادرات نامية ذات حيوية جيدة متميزة على وسط (MS) Murashige and Skoog الصلب. وأستحدث الكالس من قطع السيقان تحت الفلقية للبادرات على وسط MS الصلب والمدعم بإضافة 1.0 ملغم لتر ! لكل (BA) Benzyl adenine(NAA) Naphthaleneacetic acids ، les )2,4-1< )2,4-Dichlorophenoxyacetic acid بنسبة بلغت 100, وانتاج مزارعه بعد 25 يوماً. ومن النتائج المميزة ظهور نموات خحُضرية تلقائياً بعد 7 أيام من إعادة الزراعة الاولى للكالس التي تطورت لاحقاً إلى أفرع خُضرية تحمل أوراق حقيقية ، جُذرت بسهولة في وسط MS الصلب بكامل قوته التركيبية بنسبة 99100 وأنتجت نبيبات ALIS بعد 21 يوماً. تطرقت الدراسة الحالية إلى الكشف عن قدرة بلازميدات Ri المعزول من ATTC15834 لبكتريا Agrobacterium rhizogenes بعد مدد تحضين مختلفة لوحدها في Glas} التحول الورائي لنباتات البابونج . ul نتائج حقن تلك البلازميدات مباشرة في قطع السيقان تحت الفلقية للبادرات بعمر 15 Logs بطريقة الحقن المباشر إلى استجابتها ونشوء الجذور الشعرية. ومع تفوق التركيز 1214.32 نانوغرام مايكروليتر ' من الناقل البلازميدي في تحفيز أعلى نسبة بلغت %80 بعد7 أيام من التلقيح. وأستمر نمو الجذور الشعرية بعد إستتصالها مُنفردة أو بهيئة تجمعات ووضعها على free from plant lass MSO) growth regulators )الصلب وتكوينها مزارع das إذ Cure} هذه الجذور بسرعة نموها ولونها الأبيض وسلبيتها للانتحاء الأرضي. أثبتت نتائج الترحيل الكهربائي في طبقة هلام الاكاروزن 961 للحمض النووي الكروموسومي (DNA) Deoxyribonucleic acid المضحّم بتقانة Polymerase chain (PCR) reaction والمُستخلص من الأنسجة المُلفّحة بالناقل البلازميدي تحوّلها الورائي دليلآً عن وجود جين rol A في جينومها عند إستخدام بادئ متخصص للجين ذاته ، إذ أظهرت وجود حزمة واحدة بلغ Wane الجُزيئي م248 وهو مايمائل الوزن الجزيئي للبادئ المُستخدم للجين. قدرت الدراسة تقدير تراكيز مُركبي الأبجينين والكامازولين في أنسجة نبات البابونج المُختلفة بتقانة كروماتوكرافيا السائل celle الأداء (HPLC) High Performance Liquid Chromatography cid, الأفرع الخُضرية المحوّلة ورائياً ببلازميدات (Ri) root inducing ذي التركيز 1214.32 نانوغرام مايكروليتر ' بمحتواها العالي من الأبجينين والكامازولين ،“حيث بلع 0.4451 ٠ 0.344318 مايكروغرام مل ' على التوالي متفوقة عن باقي العيّنات والمقارنة . أظهرت المُستخلصات الأيثانول %75 الكحولية للمجموع الحخُضري GL البابونج Matricaria chamomilla L. كفاءة في تثبيط نمو الأنواع البكتيرية(1.0011 ، Pseudomonas (Klebsiella pneumonia ، Enterococcus columbae ، aeruginosa إذ أظهر المُستخلص الكحولي للأفرع الخُضرية لنبات البابونج المحولة وراثياً بالناقل البلازميدي اعلاه تاثيراً واضحاً على نمو جميع الأنواع البكتيرية مع تفوق الحجم 100مل المضاف اليهما مساحة بأقطار بلغت 12,7,9,11 ملم على التوالي.
Abstract
A The current study succeeded in propagating the chamomile (Matricaria chamomilla L.) plantlets by tissue culture technology and subjected it to the genetic transformation by direct injection methods with plasmids vector, root inducing plasmid (pRi), isolated from Agrobacterium rhizogenes ATCC15834 bacteria. As well as measuring the concentrations of apigenin and chamazulene compounds in various tissues. Chamomile plant seeds recorded a germination percent at 90% after 7 days produced seedlings with good and distinct vitality on solid Murashige and Skoog (MS) medium. The results showed easily callus initited from hypocotyle stems of seedlings on solid MS medium supplemented with 1.0 mg L-1 for each of Naphthaleneacetic acid (NAA), Benzyl adenine (BA) and 2,4- Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), where the callus initiated at 100% and after 25 days its cultures produced. One of the distinctive results was the spontaneous appearance of vegetative growths after 7 days from first subcultured of the callus, later developed into vegetative branches bearing true leaves. They rooted easily in MS solid medium at 100% within 21 days to produce a complete plantlets in the medium. The current study investigated the ability of plasmid (Ri) vector isolated from the Agrobacterium rhizogenes ATTC 15834 after different incubation periods alone for genetic transformation of chamomile plants (Matricaria chamomilla L.). The results of injected Ri plasmids directly into hypocotyl stem isolated from 25-day-old seedlings led to its response and hairy roots formed, and the 1214.32 ng μl-1 of plasmid was superior on other concentrations in stimulated the highest rate of hairy root initiation reached to 80% after7 days of inoculated. After removing them individually or in groups and placed them on solid MSO medium, all types of
طلب نسخة من الملف
الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.