تأثير الأشكال المتعددة لجين مثبط منشط البلازمينوجين-1 المعزول من دم مرضى تصلب الشريان الأبهر وتقييم التأثير العلاجي للمركبات النانوية المحضرة من نبات المر Commiphora myrrh في الفئران المصابة بتصلب الشريان الأبهر

الباحث

قصي حازم يحيى صالح الحكيم

المشرف

محمد بحري حسن السعدون

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم الكيمياء

الشهادة

دكتوراه

السنة

2024

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

PAI-1 Gene Polymorphism ; Aortic Atherosclerosis ; Commiphora myrrh ; Nanoparticles

تضمنت الدراسة الحالية ستة اجزاء: - الجزء الاول: يشمل الدراسة السريرية التي أجريت على مجموعة مكونة من (140) شخصا من الذكور والاناث تراوحت أعمارهم ما بين )73-30( سنة، تم تقسيمهم على النحو التالي (70) عينة لمرضى تصلب الشريان الابهرء و(70) عينة من الاشخاص كمجموعة ضابطة . قُدر مستوى تركيز كل من: متبط منشط البلازمينوجين -1 ( 2481-1 )، و انترلوكين -6 (11-6)، وعامل نخر الورم - الفا (TNF-Alpha) وسكر الكلوكوز (GLU) والالبومين(410) والمالوندايالديهايد (MDA) و البيروكسي نتريت (PN) والكلوتائيون (GSH) والكوليسترول الكلي (TC) والكليسيريدات الثلاثية (TG) وكوليسترول البروتين الدهني واطئ الكثافة (LDL-C) وكوليسترول البروتين الدهني عالي الكثافة-.](111 ،C اضافة الى المغنيسيوم(ع21 ) والزنك (Zn) بينت النتائج التي تم التوصل إليها وجود زيادة معنوية عند مستوى الاحتمالية (0.01> (p لمرضى تصلب الأبهر للمتغيرات: TNF-a 5 IL-6 5 PAI-1) و GLU و2424 و21 و ©1 و TG و (LDL-C كما أظهرت النتائج انخفاضًا معنوياً في مستوى مضادات الأكسدة GSH) ALB; و HDL-C و Mg و (Zn مقارنة بمجموعة السيطرة . فضلا عن ذلك ٠ تمت دراسة تأثير ،niall والعمرء والتدخين، وفصيلة pall على المتغيرات المقاسة. حيث أظهرت نتائج تأثير الجنس وجود فرق معنوي في مستوى تركيز PAI-1) و IL-6 TNF-a 5 و MDA; ALB و (LDL-C كما اظهرت الدراسة عدم وجود فروق معنوية في تركيز(ع2 وم2 PN;GLU; و :16 و HDL-C و (GSH بين الذكور والاناث لمرضى تصلب الشرايين الابهري. دراسة تأثير العمر Gad الحالات المرضية والطبيعية إلى ثلاث مجاميع عمرية وهي (30- 45) و (46- 60) و (اكبر من 60 سنة). أظهرت النتائج وجود فرق معنوي في تركيز كل من PAI-1) و 6حآ1 و [1]آ© و MDA و PN و TGs TC و LDL )عند مستوى الاحتمالية (Pp > 0.05 ( وكانت اعلى Aad للفئة العمرية (أكبر من 60 سنة) مقارنة بالفئات الاخرى . وانخفض تركيز (TNF-a) في الفئة العمرية الثانية والثالثة. وانخفض Alb) و 0511© (HDL-C ، بشكل معنوي للفئات العمرية الثلاثة ، حيث كان ادنى انخفاض في مستوى الالبومين للفئة العمرية (أكبر من 0 سنة). درس تأثير التدخين على المتغيرات المقاسة واظهرت النتائج عدم وجود فرق Gyms بين المدخنين وغير المدخنين لأغلب المتغيرات الكيموحيوية وهي IL6 5PAI-1) و TNFa و GLU ;MDAs5 ALB; ©1آو 16و HDL-C و LDL-C و (Mg وبينت النتائج وجود فرق معنوي في تركيز البيروكسي نتريت gal المدخنين ¢ كما انخفض الكلوتاثايون بشكل معنوي sal المدخنين. درست العلاقة بين (PALL) وبقية المتغيرات المدروسة لمجموعة مرضى Ghai الشرايين الأبهري الإناث والذكور ٠ وكانت نتائج التحليل وجود ارتباطات واطئة المعنوية بالاتجاه الموجب مع تركيز IL-6) و (TNF-Alpha كما أشارت النتائج الى وجود ارتباطات عالية المعنوية (0.01 > م ) بالاتجاه الموجب بلغت( 0.744 ) مع MDAsGLU) و 8ط و TC و TG و (LDL-C كذلك بينت النتائج وجود ارتباط واطئ المعنوية )0.01 > م) ل (PAL-1) بالاتجاه السالب مع تركيز GSH; ALB) و (Zn sMg sHDL-C . أظهرت النتائج تأثير فصيلة pall أن أكثر المرضى المصابين بمرض تصلب الشرايين الأبهري هم الأشخاص من فصيلة الدم + © ثم تليها At و+ 8 عو Guiry AB+ 9044.3 و 9027 و17.1, و 11.4, على التوالي. الجزء الثاني من الدراسة تضمن تنقية جزئية ل 8541-1 من مصل دم شخص يعاني من تصلب الشريان الابهر وأخر سليمء وقد طبقت تقنيات عدة للتنقية ابتداء من الترسيب بكبريتات الامونيوم ثم الفرز الغشائي فكروماتوغرافيا التبادل الايوني واخيرا الهجرة الكهربائية. كما تم الحصول على حزمة منفردة عند تطبيق الهجرة الكهربائية على البروتين المنقى (للمريض والسليم ) من التبادل الأيوني ، وكان بوزن جزيئي تقريبي مقداره (65) كيلو دالتون للشخص المصاب بتصلب الابهر و( 55) كيلو دالتون تناول الجزء الثالث من الدراسة تأثير تعدد الاشكال الجينية لجين PAI-1 (1251799889) في مرضى hei الشريان Ge! ، اظهرت النتائجح وجود ثلاثة تراكيب وراثية للجين هي التركيب الوراثي الطبيعي 4G4G ،. و التركيب الوراثي غير متمائل الزيجة 4050 © التركيب الوراثي الطافر 5656 المتمثل بالحزمة (257bp) والحزمة ( (139bp الجزء الرابع من الدراسة تضمن فصل وتشخيص نواتج طبيعية مختلفة من نبات المرء إذ تم فصل المادة الزيتية ، وأحماضها الدهنية التي تم تشخيصها بتطبيق تقنية كروماتوغرافيا الغاز ذو الاعمدة الشعرية .(CGC) كذلك Gow Ghai الفلافونويدات والقلويدات وشخصت الفلافونويدات بتطبيق تقنية كروماتوغرافيا السائل عالي الأداء (HPLC) كما تناول هذا الجزء دراسة تأثير هذه المواد على PAT-) 1) وتبين أن لها تأثير ايجابي في خفض تركيز (PAI-1) وبعض المتغيرات الاخرى المقاسة . اهتم المحور الخامس باختبار تأثير المواد الطبيعية المفصولة من نبات المر ومتغيرات كيموحيوية أخرى في مصل دم الفئران المستحدث فيها مرض تصلب الشريان الابهرء وقد استحدث هذا المرض نتيجة لمعاملة الحيوانات ببيروكسيد الهيدروجين (661) لمدة ثلاثة اشهر وتم التأكد من الاصابة من خلال الدراسة النسيجية للشريان الأبهر ، فضلا عن اختبار مستوى المتغيرات الكيموحيوية ذات العلاقة بالمرض TCs HDL-C sIL-6sTNF sLDL-C) (gn. و (Glu sTG تناول الجزء السادس من الدراسة تحضير المركبات النانوية Liposome ( LNPS) من النواتج الطبيعية وتشخيص نلك المركبات بطريقة Field Emission Scanning Electron Microscopy .(FESEM) كما درس التأثير العلاجي للمركبات النانوية المحمل عليها النواتج الطبيعية المفصولة من نبات المر. اظهرت المركبات النانوية تأثير علاج ايجابي في الفئران المستحدث فيها المرض الذي تبن من خلال المقاطع النسيجية لحيوانات التجارب .

This study consists of six parts: The first Part: It focused on the clinical study that conducted on a group of 140 individuals, both males and females with ages between (30 – 73) years. The participants were divided into two groups: (70) patients with atherosclerosis and 70 control subjects. This study assessed the concentration levels of biochemical parameters, including :plasminogen activator inhibitor -1 (PAI-1) , Interleukin-6 (IL6), Tumor Necrosis Factor-Alpha (TNF-α), Glucose (GLU), Albumin (Alb), Malondialdehyde (MDA), Peroxynitrite (PN), Glutathione (GSH), Total Cholesterol(TC), Triglycerides (TG), High density lipoprolien (HDL-C), Low density lipoprolien (LDL-C), Magnesium (Mg), and Zinc (Zn). The results showed significant increases (p ≤ 0.01) in patients with aortic atherosclerosis for parameters such as (PAI-1, IL-6, TNF-Alpha, GLU, MDA, PN, TC, TG, and LDL-C). Additionally, the results indicated significant decreases in antioxidant levels, including( GSH, ALB, HDL-C, Mg, and Zn) , compared to the control group. In addition, the effect of sex, age, smoking, and blood group on the measured variables was studied. The results of the effect of sex showed a significant difference in the concentration level of (PAI-1, IL-6, TNF-α, ALB, MDA, and LDL-C) and showed that there were no significant differences in the concentration level of (Mg, Zn, GLU, PN, TG, HDL-C, and GSH) between males and females of aortic atherosclerosis patients. To study the effect of age, pathological and normal, the cases were divided into three groups: (30-45), (46-60) and (over 60 years old). The data showed a significant difference in the concentration of (IL-6, PAI-1, GLU, MDA, PN, TC, TG and LDL) at probability (P≤0.05), and the highest value was for the age group (over 60 years) compared to the other groups. The concentration of (TNF-α) decreased in the second and third categories. (ALB, GSH, and HDL-C) decreased significantly for the three age groups, where the lowest decrease in albumin levels was for the age group older than (60) years. Furthermore, the study of the influence of smoking on the measured parameters showed that there was no significant difference between smokers and non-smokers for most of the biochemical variables, namely (PAI-1). The results showed a significant difference in the concentration of peroxynitrite among smokers, and glutathione decreased significantly among smokers. Also, the relation between plasminogen activator inhibitor-1 and parameters was studied in a group patient. As a result of the analysis, there were low significant correlations in the positive direction with the concentration of( IL-6 and TNF-α), Addtionally the results indicated the presence of highly significant correlations (p ≤ 0.01) in the positive direction amounting to (0.744) with (GLU, MDA, PN, TC, TG, and LDL-C). The results also showed a low significant correlation (P ≤ 0.01) of (PAI-1) in the negative direction with the concentration of (ALB, GSH, HDL, Mg, and Zn). The results showed the effect of blood group that the majority of patients with aortic atherosclerosis are individuals with blood type O+, followed by A+, B+, and AB+. The second part: It involved the partial purification of (PAI-1) from the blood serum of aortic atherosclerosis patients and a healthy individual. In fact, we employed several techniques for purification, including ammonium sulfate precipitation, dialysis , ion exchange chromatography, and electrophoresis. Consequently, a distinct band was obtained for the purified protein, with a molecular weight of approximately (65) kDa for the aortic atherosclerosis patient and (55) kDa for the healthy individual. The third part: It investigated the genetic polymorphisms of (PAI-1) SNP for gene (RS1799889) in aortic atherosclerosis patients. The results revealed three genetic structures for the gene: the normal (4G4G) structure, the heterozygous (4G5G) structure, and the mutant (5G5G) structure with bundles of (257) bp and (139) bp. The fourth part: It focused on the separation and identification of various natural products from the myrrh plant. The study involved the isolation of the oily substance and its fatty acids, which were identified using gas chromatography. Flavonoids and alkaloids were also separated and identified using high-performance liquid chromatography (HPLC). The study found that these compounds had a positive effect on reducing PAI-1 concentration and other measured variables. The fifth part: It included the study of the impact of isolated natural products from the myrrh plant, as well as other biochemical variables in the blood serum of the mice induced with aortic atherosclerosis. The disease was induced by treating the animals with hydrogen peroxide (1%) for three months, confirmed through tissue analysis of the aortic arch and assessing levels of (LDL-C, TNF, IL-6, HDL-C, TC, TG, and Glu) . The sixth part: It involved the preparation of Liposome Nanoparticles (LNPs) from the natural products obtained from the Myrrh plant. These nanoparticles were characterized using Field Emission Scanning Electron Microscopy (FESEM). The therapeutic effect of these nanoparticles loaded with natural products was evaluated in mice with induced aortic atherosclerosis, showing a positive impact based on tissue sections of the experimental animals.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب