عزل وتشخيص بكتيريا Helicobacter pylori من عينات سريرية ودراسة الفعالية التثبيطية لنبات البروكلي وجذور عرق السوس عليها

الباحث

أحمد كمال أحمد بكر الطائي

المشرف

رواء محمود حموشي ; فتحي عبدالله منديل

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم البيئية / علوم البيئة

الشهادة

ماجستير

السنة

2024

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

جرثومة المعدة ; البروكلي ; عرق السوس ; الفعالية التثبيطية

هدفت الدراسة إلى عزل وتشخيص جرثومة المعدة Helicobacter pylori من الاشخاص المُصابين بالتهاب المعدة والامعاء gastroenteritis بواسطة اختبارات متعددة اضافة الى تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل Polymerase Chain Reaction (PCR) ضمن مدينة الموصل من مجاميع المرضى المحالين إلى وحدة aud Endoscopy _ysllill الباطنية التابع لمستشفى ابن سينا التعليمي وخلال فترة من بداية تشرين الثاني 2023 الى نهاية حزيران 2024 ولكلا الجنسين من الفئات العمرية (70-10) سنة. تم جمع 50 خزعة نسيجية بواسطة الناظور (40) مريض و(10) سيطرة إضافة الى 5 مل من دم المصاب للحصول على المصل Serum لإجراء الاختبارات المطلوية ، ومن خلال النتائج التي تم الحصول عليها Las! سيادة التهاب المعدة المزمن بنسبة %37.5 وجاءت قرحة الاثني عشر بنسبة 7025 في حين أظهرت قرحة المعدة بنسبة 9615 ومرض الارتجاع المرئي المعدة بنسبة 12.5؟ في حين أظهر سرطان المعدة أقل نسبة 9610 وكانت نسبة الذكور المصابون بأمراض المعدة والامعاء 9657.5 في حين كانت نسبة اصابة الإناث %42.5 وان الفئة العمرية بين (70-41 ) سنة أعطت أعلى نسبة للإصابة 0 في حين أعطت الفئة العمرية(20-10) سنة أقل مستوى للإصابة بنسبة YTS تم استخدام الوسط الانتقائي Columbia Blood Agar المحور لعزل البكتيريا وظهرت المستعمرات نقية شبه شفافة دائرية محدبة كريمية اللون Lele الفحص المجهري باستخدام صبغة كرام كانت المستعمرات سالبة لصبغة كرام وذات أشكال متغايرة عديدة حلزونية أو شكل حرف 5 او عصوية منحنية في اختبار اليوريز السريع للخزع النسيجية بلغت %47.5 نتيجة إيجابية من بين 40 خزعة نسيجية لمجموعة المرضى في حين أعطت %52.5 نتيجة Led ale نتيجة التحري عن الأجسام المضادة IgG الخاص بكتيريا 7.71:/074/ من عينات مصل الدم المأخوذة من مجموعة المرضى فقد اعطت نتيجة موجبة بنسبة %62.5 ونتيجة سالبة %37.5 وفي هذه الدراسة ايضاً تم التحري عن اختبار التنفس ل 20 مريضاً وكانت النتيجة %80 موجبة %205 Alls ، كما تم التحري عن مستضد الجرثومة ل 50 عينة خروج Gus أظهرت نتائج الاختبار ان 9656 اعطت نفاعلاً Lage اي تحتوي على مستضد جرثومة pylori 17 في حين أعطت %44 نتيجة سالبة وكانت نسبة الذكور في هذا الاختبار %57 اما الإناث 9654 . سبي تم إجراء اختبار لعشرة أشخاص للكشف عن مستضد الجرثومة بتقنية DCR2000 بتناول المرضى لنقيع جذور عرق السوس لمده شهر وتم قياس المستضد قبل ويعد تناول عرق السوس تبين الى مستوى Antigen لجرثومة H.pylori أظهر انخفاضاً واضحاً. باستخدام تفاعل البلمرة PCR وتضخيم الجين 71514 165 شخصت عزلة واحدة وتم تسجيلها في بنك الجينات العالمي (NCBI) واظهرت نتائج الكشف عن التتابعات الجينية ان العزلة المحلية تابعة لبكتريا 11.01:1011 . شخصت ثمان مركبات فينولية بطريقة HPLC في المستخلصات البروكلي وعرق السوس وهم كل من Quercetin , Caffeic acid, Rutin, ,kaempferol, Luteolin, Ferulic) ٠ (acid,Apigenin, Gallic acid سجل نبات البروكلي أعلى تركيز 0.4062 ملغم/ غم للمركب Gallic acid الفينولي عن زمن احتجاز بلغ 3.91 دقيقة في حين نبات عرق السوس سجل أعلى تركيز 5 ملغم /غم للمركب Gallic acid الفينولي عن زمن احتجاز بلغ 3.91 دقيقة ، أقل تركيز للمركبات الفينولية كانت المركب Cus Rutin بلغت في المستخلص الايثانولي لنبات البروكلي 0.1472 ملغم aé/ و 0.0869 ملغم/غم لمستخلص عرق السوس ، اظهر المستخلص الايثانولي لجذور عرق السوس فعالية تثبيطية جيدة حيث أعطى اعلى تثبيط عند التركيز 200 ملغم/مل وبقطر تثبيط calel3 يعتبر المضاد الحيوي Ciprofloxacin فعال lag ضد البكتيريا Gus أعطى أعلى تثبيط بقطر 20 ملم يبب :_————————

a The study aimed to isolate and diagnose the stomach bacteria Helicobacter pylori from people with gastroenteritis by multiple tests in addition to the Polymerase Chain Reaction (PCR) technique within the city of Mosul from groups of patients referred to the Endoscopy Unit of the Internal Medicine Department of Ibn Sina Teaching Hospital during the period from the beginning of November 2023 to the end of June 2024 for both sexes from the age groups (10-70) years. Where 50 tissue biopsies were collected by endoscopy (40) patients and (10) controls in addition to 5 ml of the patient's blood to obtain serum to conduct the required tests, and through the results obtained, it was noted that chronic gastritis prevailed by 37.5%, and duodenal ulcer came by 25%, while gastric ulcer showed by 15% and gastric reflux disease by 12.5%, while gastric cancer showed the lowest percentage of 10%, and the percentage of males infected with stomach and intestinal diseases was 57.5%, while the percentage of females infected was 42.5%, and the age group between (41-70) years gave the highest percentage of infection 50%, while the age group (10-20) years gave the lowest level of infection by 17.5%. The modified Columbia Blood Agar selective medium was used to isolate the bacteria and the colonies appeared pure, semi-transparent, circular, convex, and cream-colored. As for the microscopic examination using the Gram stain, the colonies were Gram-negative with many different shapes, spiral, S-shaped, or curved rods. In the rapid urease test for tissue biopsies, 47.5% of 40 tissue biopsies from the patient group were positive, while 52.5% gave a negative result. As for the result of the investigation of IgG antibodies specific to H.pylori bacteria from blood serum samples taken from the patient group, it gave a positive result of 62.5% and a negative result of 37.5%. In this study, the breath test was also investigated for 20 patients, and the result was 80% positive and 20% negative. The antigen of the bacteria was also investigated for 50 excrement samples, where the test results showed that 56% gave a positive reaction, i.e. they contained the antigen of the H.pylori bacteria, while 44% gave a negative result. The percentage of males in this test was 57%, while females were 54%. b A test was conducted on ten people to detect the antigen of the bacteria using the DCR2000 technique by having the patients consume licorice root infusion for a month and the antigen was measured before and after consuming licorice. It was found that the level of antigen for the H.pylori bacteria showed a clear decrease. Using PCR and amplification of the 16 S rRNA gene, one isolate was identified and registered in the National Gene Bank (NCBI). The results of genetic sequence detection showed that the local isolate belongs to H.pylori bacteria. 8 phenolic compounds were identified by HPLC method from broccoli and licorice extracts, which are (Quercetin, Caffeic acid, Rutin, Kaempferol, Luteolin, Ferulic acid, Apigenin, Gallic acid). Broccoli recorded the highest concentration of 0.4062 mg/g for the phenolic compound Gallic acid at a retention time of 3.91, while licorice recorded the highest concentration of 0.3115 mg/g for the phenolic compound Gallic acid at a retention time of 3.91. The lowest concentration of phenolic compounds was Rutin, which reached 0.1472 in the ethanolic extract of broccoli and 0.0869 for the licorice extract. The ethanolic extract of licorice roots showed good inhibitory activity, as it gave the highest inhibition at a concentration of 200 mg/ml and an inhibition diameter of 13 mm. Ciprofloxacin is considered a very effective antibiotic against Bacteria where the highest inhibition was given at a diameter of 20 mm.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب