الانتشار وبعض عوامل الخطورة لأنواع طفيلي الثايليريا في الضأن والقراد الناقل في مدينة الموصل، العراق

الباحث

محمد محمود حامد عبدالله الحاجي

المشرف

قيس طالب شكر السرحان

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية الطب البيطري / الطب الباطني والوقائي البيطري

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

الثايليريا ; الضأن ; القراد ; عوامل الخطورة

يي ”سنح تهدف الدراسة الحالية الى تحديد نس بة الانتشار النوعي طفيلي Theileria lestoquardi Theileria oviss في الضأن والقراد الناقل لها باستخدام الفحص المجهري للمسحات الدموية وتقانة البلمرة المتسلسل التقليدي في مدينة الموصلء العراق مع تحديد التوافق بين الاختبارين اعتمادا على قيمة Kappa value وحساب حساسية وخصوصية ودقة الفحص المجهري بالمقارنة بتقانة البلمرة المتسلسل، ودراسة بعض العوامل المؤهبة المرافقة للمرضء وتحديد وتصنيف انواع القراد المتطفل على الضأن، وتسجيل العلامات السريرية الظاهرة على الحيوانات المصابة بالمرضء ودراسة التنوع الوراثي وتحليلات النشوء للأنواع طفيلي التايليريا التي تم تشخيصها في هذه الدراسة. شملت الدراسة 185 راساً من الضأن (على وفق معادلة حجم العينة) ومن كلا الجنسين وبأعمار ومناشئ ونظم dn gi مختلفة، ومن ضمنها 20 رأساً من الضأن السليمة سريريا وسالبة مختبريا عدت كحيوانات سيطرة تم تأمينها جميعا من مناطق مختلفة من مدينة الموصلء للفترة الممتدة من شهر تشرين الاول 2021 الى شهر أيار 2022. استخدمت استمارة خاصة أعدت سابقاً لتسجيل العلامات والفحوصات السريرية المطلوبة، واستحصلت المعلومات الوبائية من مالكي الحيوانات في اثناء مدة جمع العينات. تم جمع 2.5 مليليتر من 185 راسا من الضأن من الوريد الوداجي ووضعها في انابيب حاوية على مانع تخثر لغرض عمل المسحات الدموية الرقيقة والسميكة في حال تعذر عملها من الوريد الاذني للضأن، ، وتم حفظ الباقي من الدم في المجمدة وبدرجة - 20 م* لحين cl yal تقانة تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي والمتعدد. واستعملت التسلسلات الجينية المحلية للجين rRNA 185 لطفيلي T. lestoquardi و T. ovis المشخصة في هذه الدراسة لتحليل التنوع الجيني وتحليلات النشوء ولغرض انشاء شجرة النشوء والتطور. كما تم عمل مسحات لمفية من الخزع المأخوذة من العقد اللمفية امام لوح الكتف لغرض الكشف عن أجسام كوخ الزرقاء Koch's Blue bodies داخل الخلايا اللمفية. وتم ايضا جمع 65 من القراد المتطفل على الضأن لغرض تصنيفها والكشف عن انواع طفيلي الثايلريا داخلها باستخدام تقانة البلمرة المتسلسل التقليدي والمتعدد. أظهرت نتائج الدراسة الحالية أن نسبة الانتشار الكلية للإصابة بطفيلي Lah) في الضأن في مدينة الموصل بلغت 921.6 و 9052.4 باس تخدام الفحص المجهري للمسحات الدموية و تقانة تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي على التوالي. كما لوحظ وجود توافق طفيف بين الاختبارين في تشخيص الاصابة بطفيلي الثايليريا في الضأن بالاعتماد على قيمة كابا Kappa value والتي بلغت )0.190( مع انخفاض في حساسية ونوعية ودقة طريقة الفحص المجهري والتي كانت %30 %88.6.5 و 9052.4 على التوالي مقارنة بتقانة تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي. واظهر الفحص المجهري للمسحات الدموية وللمفية وجود الطفيلي Jala كريات الدم الحمر والخلايا اللمفية وبأشكال مختلفة مع نسبة تطفل تراوحت %2- 9018 و 1 - 9015 على التوالي. فضلا عن ان نسبة انتشار الاصابة المختلطة بكلا النوعين بلغت 9022.7 والاصابة المفردة بطفيلي Jestoquardi :7 بلغت %20، وكانت أعلى معنويا (P<0.05) من الإصابة المنفردة بطفيلي ovis ,7 التي بلغت %9.7 باستخدام تقانة تفاعل البلمرة المتسلسل المتعدد، كما أظهرت النتائج وبالاعتماد على تقانة تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي وجود عوامل مؤهبة مرتبطة بحدوث زيادة في نسبة انتشار طفيلي الثايليريا في الضأن، وعانت الضأن المصابة بطفيلي الثايليريا نوع :7 01 والاصابة المختلطة من الشكل الحاد من المرضء في حين لم يظهر الضأن المصاب بطفيلي ovis 7 أية علامات سريرية. تم في هذه الدراسة تحديد وتصنيف ثلاثة انواع من القراد الصلب المتطفل على الضأن تضمنت Hyalomma 07110101111111 anatulicum و Rhipicephalus sanguineus و ‘Rh. turanicus وبنسب تطفل بلغت %56.9 و 9024.6 و 9018.4 على التوالي، H. anatolicum عونلا OSs 7 هو النوع الشائع ،واعتمادا على تقانة تفاعل البلمرة المتسلسل المتعدد تم تشخيص طفيلي الثايليريا نوع lestoquardi :17 و ovis 7 في اناث القراد المحتقنة من نوع 07101011211712 H. ،Rh. sanguineus sanatolicum فلا عن تشخيص T. lestoquardi فقط في .Rh. turanicus أظهرت نتائج تحليل التسلسلات الجينية المحلية لطفيلي الثايليريا نوع T. ovis )3 تسلسلات) والمسجلة في بنك الجينات بأرقام تسلسلية (5001587© و 5001588© و 02001589)، وجود نسبة تشابه 90100 مع التسلسلات الجينية المسجلة في باكستان والهند. كما أظهرت نتائج hiss التسلسلات الجينية المحلية لطفيلي الثايليريا نوع 712500120707 :3(7 تسلسلات) والمسجلة في بنك الجينات بأرقام تسلسلية OPO01630) و 02001631 و ،(OPO01632 وجود نسبة تشابه 90100 مع التسلسلات الجينية المسجلة في إقليم كردستان-العراق ومحافظة السليمانية ومصر والسودان وايطاليا. وبينت شجرة النشوء الجيني بعد إجراء إعادة تشكيل التسلسلات النيوكلوتيدية 100 مرة باستعمال تحليل Bootstrap وجود علاقة تطورية عالية بين التسلسلات الجينية المحلية لطفيلي T. lestoquardi و T. ovis مع التسلسلات العالمية لنفس الطفيليات نفسها المشار اليها في اعلاه. استنتجنا من الدراسة أن كل من طفيلي :7 03 و ovis !7 واسعا الانتشار في الضان والقراد الناقل لها في مدينة الموصلء العراق.

A | The current study aims to determine the prevalence of Theileria lestoquardi and Theileria ovis parasites in infected sheep and it's transmitted ticks using microscopic examination of blood smears (ME) and conventional polymerase chain reaction (c-PCR) technique in Mosul city, Iraq, to determine the agreement between the two tests based on Kappa value and calculating sensitivity, specificity and accuracy of ME in comparison with the c-PCR technique, to investigates some of the predisposing factors associated with the prevalence of the disease, to identification and classification the types of ticks infested sheep, to records the clinical signs appearing on animals infected, and to study the genetic diversity and phylogenetic analysis of the Theileria spp. which were detected in this study. The study included 185 sheep of both sexes, with different ages, origins and management, including 20 sheep which were clinically healthy and laboratory negative used as control animals, were obtained randomly from sheep in different regions in Mosul city. During the period from October 2021 to May 2022. A special clinical examination card was used to record the clinical signs, and epidemiological information was obtained through an interview with the owners during sample collection. A 2.5ml of 185 sheep were collected from the jugular vein and placed in tubes containing anticoagulant used for preparing thick and thin blood smears, if it could not be prepared via the ear vein puncture, and the rest of the blood was kept at - 20°C until the used in c-PCR and multiplex-PCR(m-PCR) techniques. The local sequences of the 18S rRNA gene of T. lestoquardi and T. ovis which were identified in this study, and used for genetic diversity, phylogenetic analyses and phylogenetic tree. In addition, lymph smears were prepared from prescapular lymph nodes biopsy to detect Koch's Blue bodies inside the lymphocytes. Sixty-five ticks infested sheep B | were collected for classification and detection of Theileria spp. inside them using c- PCR and m-PCR techniques. The results of this study showed that the overall prevalence of Theileria spp. In sheep in Mosul city was 21.6% and 52.4% using ME and c-PCR technique respectively. A slight agreement was observed between ME of blood smears and c- PCR technique according to Kappa value (0.190), with low sensitivity, specificity and accuracy of ME method were 30%, 88.6%, 52.4% respectively compared with c- PCR technique. In this study, ME of blood and lymphatic smears observed that the presence of the Theileria spp. inside red blood cells and lymphocytes in different forms with parasitemia ranging from 2%-18% and 1%-15%, respectively. As well as, the prevalence of mixed infection with both types was 22.7% and single infection with T. lestoquardi was 20%, which was significantly (P<0.05) higher than single infection with parasite 9.7% using the m-PCR technique. The results, based on the c-PCR technique, administrated that the presence of predisposing factors associated with the high prevalence of Theileria spp. in infected sheep, and infected sheep with T. lestoquardi and mixed infection suffered from the acute form of the disease. While, sheep infected with T. ovis were absent clinical signs. In this study, three species of hard ticks infested sheep were identified and classified includes Hyalomma anatolicum anatolicum, Rhipicephalus sanguineus, and Rh. Turanicus 56.9%, 24.6% and 18.4% respectively, With most common H. anatolicum anatolicum species. Moreover, based on the m-PCR technique, T. lestoquardi and T. ovis were detected within engorged female ticks of H. anatolicum anatolicum and Rh. sanguineus species, as well as, T. lestoquardi only was detected within Rh. Turanicus. The results of the local sequences analysis of the T. ovis (3 Sequences) which were recorded in the gene bank with accession numbers (OP001587, OP001588 and OP001589) showed a 100% identity with the sequences recorded in | Pakistan and India. As well as, local sequences of the T. lestoquardi (3 sequences) which were recorded in the gene bank with accession numbers (OP001630, OP001631 and OP001632), showed a 100% identity with the sequences recorded in the Kurdistan regions-Iraq, Sulaymaniyah governorate, Egypt, Sudan and Italy. The phylogenetic tree after performing 100 nucleotide sequence reconstructing using Bootstrap analysis showed a high developmental relationship between the local sequences of T. lestoquardi and T. ovis with other global sequences same parasites indicated above. We concluded that both T. lestoquardi and T. ovis are widespread among sheep and it's transmitted ticks in Mosul city, Iraq.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب