مدى انتشار جراثيم السالمونيلا المنتجة للبيتالاكتاميز في الحمام المحلي في محافظة نينوى

الباحث

محمد جاسم محمد عويد

المشرف

عقيل محمد شريف خضر

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية الطب البيطري / الصحة العامة البيطرية

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

السالمونيلا ; البيتالاكتاميز ; الحمام المحلي ; محافظة نينوى

أجريت هذه الدراسة عن مدى إصابة الحمام غير البالغ والحمام البالغ وبيئة تربيتهما من calles ومناهل وفرشة وأيدي المربين بجراثيم السالمونيلا ل 34 منطقة موزعة في محافظة نينوى. إذ تم أخذ 400 مسحة للأعضاء الداخلية من الحمام غير البالغ والحمام البالغ، وزعت على الشكل التالي: 195 مسحة للحمام غير البالغ (بعمر أقل من 6 أشهر ) شملت 50 مسحة أمعاء و50 مسحة أكباد و35 مسحة من فتحة المجمع و35 مسحة قلب و 20 مسحة طحال و5 مسحات بنكرياس ٠، وكذلك 205 مسحة للحمام البالغ (أكثر من 6 أشهر) شملت 50 مسحة أمعاء و50 مسحة أكباد و40 مسحة من فتحة المجمع و40 مسحة قلب و 20 مسحة طحال و5 مسحات بنكرياس. أما مسحات بيئة تربية الحمام فقد شملت 50 مسحة من الفرشة و50 مسحة من المعالف و45 مسحة من المناهل(مياه الشرب) و 5 مسحات لغسول أيدي المربين .أسُتخدمت مختلف الأوساط الناقلة والأغنائية والانتخابية في athe je السالمونيلا وتم التاكد منها باستخدام الصبغات والفحوصات الكيموحيوية الخاصه بها. ولأختبار الحساسية أخُضعت 30 مسحة من aie السالمونيلا المعزولة ل 16 نوع من انواع المضادات الحيوية. تم فحص قابلية 16 من عزلات athe السالمونيلا في انتاجها لانزيم البيتا لاكتاميز بأستخدام المضادات الحاوية على حلقة البيتا لاكتام. كما وجُمعت ومن الطيور ذاتها 23 عينة دم من الحمام غير البالغ و 69 عينة من الحمام البالغ لقياس مستوى أضداد ails ال Salmonella enteritides باستخدام طريقة الادمصاص(الإمتزاز) المناعي المرتبط بالانزيم (ELISA) ولتحديد نوع جرائيم السالمونيلا المعزولة بالاعتماد على جين 16SrRNA تم استخدام تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) لإربعة عزلات شملت عينات من أيدي المربين ومن الفرشة ومن عينات الحمام غير البالغ والحمام البالغ والتعرف على التسلسل الجيني من خلال شجرة النشوء والتطور. وللوقوف على فوعة asia السالمونيلا المعزولة من الحمام تم استخدام ثلاث بادءات هي 17007 و 11/0 و IucD على 10 عزلات أخذت من الحمام غير البالغ والحمام البالغ وبيئة التربية، أوضحت نتائج عزل جرائيم السالمونيلا من الحمام غير البالغ إن نسبة العزل من الاعضاء الداخلية بلغت 24% ، 6% 5.7% 2.8% 5 0% و 096 لكل من مسحات الامعاء والكبد وفتحة المجمع و القلب والطحال و البنكرياس على التوالي وبنسبة كلية بلغت 9.2390 ، نسبة عزل athe السالمونيلا من الأمعاء كانت أعلى من بقية الاعضاء الاخرىء Lal نسبة العزل في الأعضاء الداخلية للحمام البالغ فكانت كالآتي:3690 ، 14%، 15% ،5% :1096 5 0% لكل من مسحات الأمعاء والكبد وفتحة المجمع و القلب والطحال و البنكرياس على التوالي وبنسبة كلية بلغت 1790 ٠ وكانت نسبة عزل abla السالمونيلا من الأمعاء فيها ايضا أعلى من بقية الأعضاء الأخرى. وفيما يخص نسبة عزل جرائثيم السالمونيلا من مسحات المحيط فقد بلغت 0 ،6640 5 20% لكل من مسحات الفرشة والمعالف والمناهل وأيدي المربين على التوالي، وعليه فإن النسبة الكلية لعزل ashe السالمونيلا من الحمام وبيئتهُ هي 15906 ( العدد الكلي للعينات - 550 عينة) . أوضحت النتائج أن المقاومة ل 30 من عزلات السالمونيلا للمضادات الحيوية وجود مقاومة عالية للسيبروفلوكساسين (73.3396) يليها الكوليستين )270( ،والفلورفينيكول )66.6%(، ثم سلفاميثوكسازول- تريميثوبريم )%60(، لينكومايسين وأموكسيسيلين (46.640) ، سبيرامايسين ودوكسيسايكلين (4090) ٠ تتراسيكلين (36.66946) ٠ ليفوفلوكساسين وانروفلوكساسين (33.3390)، فوسفوميسين )26.6%( ¢ نورفلوكساسين )23.3%( © سيفاليكسين ¢ نيومايسين وجنتاميسين )16.6%( . Lady يخص انتاج عزلات السالمونيلا لانزيم البيتا لاكتاميز فقد اتضح Gf النسبة باستخدام طريقة القياس الحمضي هي 13 عزله من 16عزلة )781.25( ، وبأستخدام طريقة انتشار القرص كان هناك 7عينات موجبة )443.75( للمضادات ذات الطيف الواسع (ESBL) وبنسبة مقاربة كان هناك أيضاً 6 / 16 (737.50/) عينات موجبة للمضادات ذات الطيف الواسع B -lactam نوع (ESBL / ampC) ampC وأوضحت نتائج قياس مستوى الأضداد أن 5عينات من مجموع 23 (21.73/) للحمام غير البالغ كانت موجبة لأضداد Salmonella enteritides باستخدام تقنية IDEXX iELISA بمعيار أضداد (681) وهو أعلى من معيار أضداد العينات السالبة (215.5) .اما في الحمام البالغ فقد ظهر إن 8 عينات من مجموع 69 Aue )11.59%( كانت موجبة لإضداد 5 101611 وبمعيار أضداد )793.62( وهو أعلى من معدل العينات السالبة (202.65). كانت نتائج تفاعل PCR للتسلسلات الجينية في عزلات السالمونيلا والمرسلة الى بنك الجينات GenBank والتي شملت غسول Gal المربين ، و الفرشة ، والحمام غير البالغ و الحمام البالغ إن المسحة المأخوذه من غسول أيدي المربين تعود إلى Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium كما وأظهرت النتائج ولأول مرة في العراق وفي محافظة نينوى تسجيل ثلاثة تسلسلات جينية جديدة وهي للعزلة المأخوذة من الفرشة وهي 210-41 (LOCUS LC714863) و من الحمام غير البالغ LOCUS LC714864) MO-A2 ) ومن الحمام البالغ MO-A3 (LOCUS LC714865) أما فيما يخص عوامل de sill التي تحملها athe السالمونيلا فقد اتضح إن عزلات السالمونيلا ال10 من تلك التي تم فحصها حاوية aren على عوامل الضراوة IucC و IucD و N 170 الثلاثة وبنسبة )100%( .

A study was conducted to elucidate the prevalence of Salmonella infection in squabs, adult pigeons and their rearing environment including feeders, waterers, litter and hands of breeders. The study involve 34 districts in Nineveh Governorate. Four hundred swabs were taken from the internal organs of squabs and adult pigeons and were as follows: 195 samples from squabs (aged less than 6 months), including 50 samples of intestines, 50 samples of livers, 35 samples from the cloaca, 35 samples of hearts, 20 samples of spleens and 5 samples of the pancreas. from adult pigeons (more from 6 months), 205 samples were taken included 50 bowel samples, 50 liver samples, 40 samples from waterers, 40 heart samples, 20 spleen samples and 5 pancreatic samples. As for the pigeon breeding surroundings, the samples included 50 litter samples, 50 feeder samples, 45 waterers samples and 5 breeders' hand wash samples. Various transport, enrichment and solid media were used to isolate Salmonella spp. which were confirmed using various biochemical tests. For sensitivity testing to antimicrobials, 30 samples of Salmonella isolates were subjected to 16 different antibiotics, as well as the ability of 16 of the isolates were tested for their ability to produce beta-lactamase enzyme against beta-lactam antibiotics. In addition, 23 blood samples were collected from squabs and 69 samples from adult pigeons were collected for estimation the level of antibodies against Salmonella enteritides using the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method. B The Genetic sequence and phylogenetic tree of some of Salmonella isolates from squabs, adult pigeons and their environment was done. To determine the virulence of the isolated Salmonella spp., three genes were used: IroN, IucC and IucD on 10 isolates taken from squabs, adult pigeons and their environment. The results of isolating Salmonella spp. from squabs showed that the percentages of isolation from the internal organs were 24, 6, 5.7, 2.8, 0 and 0% for Intestine, Liver, Cloaca, Heart, Spleen and Pancreas, respectively, with a total percentage of 9.23%. The percentage of isolation of salmonella spp. from the intestine w s signific ntly (p≤0.05) higher than the rest of the other organs. The percentages of Salmonella spp. isolated from the internal organs of the adult pigeons were as follows: 36, 14, 15, 5, 10, and 0% from the Intestines, Liver, Cloaca, Heart, Spleen and Pancreas, respectively, with a total percentage of 17%. The percentage of isolating Salmonella spp. from the intestine w s lso signific ntly (p≤0.05) higher th n the rest of the other organs. Regarding the percentages of Salmonella spp. isolated from the surrounding they were 30, 22, 6.66, and 20% from the Litter, Feeder, W terers, nd breeders’ hands samples. Therefore, the total percentage of Salmonella spp. isolated from pigeons and their surrounding is 15% (total number of samples = 550 samples). The results of antimicrobial resistance of 30 Salmonella isolates to 16 antibiotics were in a descending manner as follows: Ciprofloxacin (73.33%), followed by Colistin (70%), Florphenicol (66.6%), Sulfamethoxazole-trimethoprim (60%), Lincomycin and Amoxicillin (46.6%), Spiramycin and Doxycycline. (40%), Tetracycline (36.66%), Levofloxacin and Enrofloxacin ((33.33%), Fosphomycin (26.6%), Norfloxacin (23.3%), Cephalexin, Neomycin and Gentamicin (16.6%). The result about the positive proportion of salmonella isolates for their ability in ß-lactamase enzyme production using the acidometric method were 3 out of 16 (18.75%); 7/16 (43.75%) by applying disc diffusion method and 6/16 (37.50%) were Positive to extended-spectrum ß-lactam type (ampC) (ESBL / ampC). Salmonella antibodies level in squabs and adult pigeons showed that five samples from squabs out of 23 (21.73%) were positive to Salmonella enteritides antibodies using IDEXX iELISA technique with a titer of (681), which w s signific ntly (p≤0.05) higher th n the titer of neg tive samples (215.5). While for the adult pigeon, it appeared that 8 samples out of a total of 69 samples (11.59%) were positive to Salmonella enteritides antibodies with a titer of (793.62) which was also significantly (p≤0.05) higher than negative sample rate (202.65). The results of the PCR reaction for the genetic sequences of Salmonella isolates that sent to the GenBank and taken from breeders' hand wash, litter, squabs, and adult pigeons showed that the sample taken from the breeders' hand wash belonged to Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium. While and for the first time in Iraq and in Nineveh governorate, three new genes were registered and they were: Salmonella isolate from the litter MO-A1 (LOCUS LC714863), Salmonella isolate from squabs MO-A2 (LOCUS LC714864) and Salmonella isolate from adult pigeons MO-A3 (LOCUS LC714865). With regard to the virulence factors borne by Salmonella spp., it was found that all Salmonella isolates tested (n=10), contained the virulence factors IucC, IucD and IroN with a percentage of (100%).

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب